题目内容
【题目】回答下列(1)、(2)小题：
（1）随着社会的发展，石油产品的使用越来越多，石油烃污染也越来越严重。为了筛选出分解石油烃能力强的微生物，人们不断地进行研究。下图为获取能分离出分解石油烃的微生物的土壤样品后的研究过程，请回答有关问题：
⑴获取土壤样品的取样地点最好选在。为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，过程①④所用的选择培养基只能以石油烃作为唯一碳源，其原因是。
⑵根据⑤平板上生长的菌落，对④进行接种采用的方法是法，若发现在⑤中无法区分菌落，可以将图中③取出的菌液。
⑶纯化菌株时，通常使用的划线工具是。采用方法对其进行灭菌。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是(写出一点即可)。
（2）毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
⑴获取外源基因用到的工具酶是。
⑵在过程②中，用酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术，叫细胞克隆。未经克隆化的细胞系具有性。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入一定量的 ， 在培养过程中应将培养瓶置于培养。
⑶若要获得多只相同的转基因山羊，可对图中早期胚胎进行后进行胚胎移植。
⑷下列有关转基因山羊培育过程的叙述，错误的是。
A．图中重组细胞的细胞核来自导入目的基因的细胞
B．重组细胞最初分裂时开始进行DNA复制和基因的转录
C．将早期胚胎(如早期囊胚)植入到代孕母羊的输卵管或子宫角部位
D．如果KIFⅡ基因的序列是已知的，则可用化学方法合成或用聚合酶链反应扩增该基因
【答案】
（1）石油烃污染明显处,只有能利用石油烃的微生物能正常生长繁殖,涂布分离,进行（梯度）稀释,接种环,灼烧,接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始划线
（2）限制性核酸内切酶,胰蛋白酶,异质,动物血清,CO2培养箱,胚胎分割,B
【解析】解：（1）⑴要获取相应的菌种，应到相应的环境中获取，获取土壤样品的取样地点最好选在石油污染明显处。⑵常用灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法。培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次：高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法。⑶接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落。(2）分析题图：图示是获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程图，其中①表示基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶和DNA连接酶；②表示动物细胞培养过程；③表示从成年母绒山羊中获取卵母细胞。⑴表示基因表达载体的构建过程，该过程首先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，其次还要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子。⑵②表示动物细胞培养过程，该过程中要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理将皮肤组织块，使之分散成单个成纤维细胞。未经克隆化的细胞系具有异质性。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入一定量的动物血清，在培养过程中应将培养瓶置于CO2培养箱培养。⑶从重组细胞到早期胚胎需要采用（早期）胚胎培养技术．在胚胎移植前，通过胚胎分割技术可获得较多胚胎。⑷A.图中重组细胞的细胞核来自导入目的基因的细胞，A正确；
B.重组细胞最初分裂前就有基因的转录，B错误；
C.将早期胚胎（如早期囊胚）植入到代孕母羊的输卵管或子宫角部位，便于早起胚胎的着床，C正确；
D.化学方法合成或用聚合酶链式反应扩增可用于获取已知序列的目的基因，D正确
【考点精析】根据题目的已知条件，利用基因工程的原理及技术和胚胎分割移植的相关知识可以得到问题的答案，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术；胚胎分割是用机械方法将早期胚胎切割成2、4、8等分等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术．由于来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此胚胎分割可看作是动物无性繁殖或克隆的方法之一．
【题目】果蝇的体色中的黄与黑为一对相对性状，由等位基因B,b控制。眼色中的红色与白色为另一对相对性状，由等位基因D,d控制。这些基因均不位于Y染色体上。在体色遗传中，具有某种纯合基因型的合子不能发育。让体色、眼色相同的多对果蝇交配（其中雌果蝇的基因型相同，雄果蝇的基因型相同)，所得子一代类型及在子一代总数的比例如下表。
黄毛红眼 | 黄毛白眼 | 黑毛红眼 | 黑毛白眼 | |
雌蝇 | 4/12 | 0 | 2/12 | 0 |
雄蝇 | 2/12 | 2/12 | 1/12 | 1/12 |
请回答下面相关问题：
（1）亲代雌果蝇的基因型是。
（2）若不考虑体色性状的遗传，子一代中全部的红眼雌果蝇产生的卵细胞的基因型有种，其理论上的比例是。
（3）子一代中黄毛红眼雌果蝇与黄毛白眼雄果蝇随机交配，子二代中黄毛红眼雌果蝇的比例为,其中纯合子占的比例为。
（4）请用遗传图解表示以子一代中黑毛红眼的纯合雌果蝇与黄毛白眼的雄果蝇为亲本杂交得到子代的过程。
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