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【生物——选修3:现代生物科技专题】
人外周血单核细胞能合成白介素2(IL~2)。该蛋白可增强机体免疫功能,但在体内易被降解。研究人员将IL-2基因与人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一个融合基因,并在酵母菌中表达,获得具有IL-2生理功能、且不易降解的IL-2-HSA融合蛋白。其技术流程如图。请回答下列问题。
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(1)培养人外周血单核细胞需要无菌、无毒的环境,为防止培养过程中的污染,通常要在细胞培养液中添加一定量的_____;为保证营养充足,通常要在细胞培养液中添加_____;除提供适宜培养温度和pH外,还需适宜气体环境,通常将培养皿置于含_____的混合气体培养箱中进行培养。
(2) 图中②表示________过程,图中③表示________过程。
(3) 表达载体1中的位点________,应为限制酶BglⅡ的识别位点,才能成功构建表达载体2。表达载体2导入酵母菌后,融合基因转录出的mRNA中,与IL-2蛋白对应的碱基序列不能含有________(起始、终止)密码子,才能成功表达出IL-2-HSA融合蛋白。
(4)应用____________杂交技术可检测酵母菌是否表达出IL-2-HSA融合蛋白。IL-2-HSA融合蛋白从酵母菌细胞中排出,需要酵母菌细胞中_________(细胞器)的加工。
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