Question

10．根据微生物分离和培养的知识，回答下列问题：
（1）分离纯化大肠杆菌的关键步骤是接种，该步骤常用的方法有两种：平板划线法和稀释涂布平板法，其中一种方法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固定培养基的表面进行培养．
（2）在微生物的实验室培养过程中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵，因此需要对培养基和培养皿进行灭菌处理，操作者的双手需要进行清洁和消毒．
（3）分离分解尿素的细菌的培养基中要以尿素为唯一氮源（填“碳源”或“氮源”）．

Answer 1

分析 1、消毒和灭菌

	消毒	灭菌
概念	使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法	灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象	操作空间、某些液体、双手等	接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）分离纯化大肠杆菌的关键步骤是接种，该步骤常用的方法有两种：平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固定培养基的表面进行培养．
（2）在微生物的实验室培养过程中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵，因此需要对培养基和培养皿进行灭菌处理，操作者的双手需要进行清洁和消毒．
（3）分离分解尿素的细菌的培养基中要以尿素为唯一氮源．
故答案为：
（1）接种       平板划线法      稀释涂布平板法     梯度稀释
（2）防止外来杂菌入侵          灭菌            消毒
（3）氮源

点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记无菌技术，掌握接种微生物的两种常用的方法，能结合所学的知识准确答题．