题目内容

11．人外周血单核细胞能合成白细胞介素2（11-2）．该蛋白可增强机体免疫功能，在体内易被降解．研究人员将IL-2基因与人血清白蛋白（HSA）基因拼接成一个融合基因，并在酵母菌中表达，获得具有IL-2生理功能、且不易降解的IL-2-HSA融合蛋白．其技术流程如图．请回答：
（1）②过程需要逆转录酶；表达载体1中的a （填字母）位点应为限制酶BgLll的识别位点，才能成功构建表达载体2
（2）在上述基因工程的操作过程中一般需要遵循碱基互补配对原则的步骤有②③④（序号表示）．
（3）表达载体2导入酵母菌后，融合基因转录出的mRNA中，与IL-2蛋白对应的碱基序列不能含有终止密码子，才能成功表达出IL-2-HSA融合蛋白．
（4）利用PCR扩增仪大量扩增目的基因的前提是目的基因的核苷酸序列要有一段是已知的，以便根据这一序列合成引物，除了该物质和目的基因外，扩增仪中还需加入四种脱氧核苷酸和耐高温的DNA聚合酶 酶，并适时调整温度，才能使目的基因数量成指数式增长．

分析 分析题图：①表示从人的外周学细胞去mRNA；②表示以mRNA为模板逆转录形成cDNA的过程；④表示基因表达载体的构建过程，需要限制酶和DNA连接酶．目的基因IL-2cDNA的两端的酶切位点分别是EcoRⅠ和BglⅡ，所以表达载体1也必须有这两个酶切位点，而表达载体1上已有EcoRⅠ，因此位点a应含有BglⅡ．

解答 解：（1）分析图解可知，②过程表示逆转录，该过程需要逆转录酶．根据目的基因IL-2cDNA的两端的酶切位点分别是EcoRⅠ和BglⅡ，所以表达载体1也必须有这两个酶切位点，表达载体1上已有EcoRⅠ，推测位点a应含有BglⅡ．
（2）遵循碱基互补配对原则的过程有DNA复制、转录、翻译、逆转录过程，图中②表示以mRNA为模板逆转录形成cDNA的过程，遵循碱基互补配对原则．③PCR技术是体外扩增DNA过程，原理DNA复制，遵循碱基互补配对过程；④表示基因表达载体的构建过程，遵循碱基互补配对原则．
（3）融合基因转录出的mRNA中与IL-2蛋白对应的碱基序列中不能含有终止密码，才能成功表达出IL-2-HsA融合蛋白．否则HSA蛋白将无法合成．
（4）利用PCR扩增仪大量扩增目的基因的前提是目的基因的核苷酸序列要有一段是已知的，以便根据这一序列合成 引物，除了该物质和目的基因外，扩增仪中还需加入四种脱氧核苷酸和 耐高温的DNA聚合酶 酶，并适时调整温度，才能使目的基因数量成指数式增长．
故答案为：
（1）逆转录    a
（2）②③④
（3）终止密码子  
（4）引物      耐高温的DNA聚合酶

点评 本题结合图解，考查基因工程和细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节；识记PCR技术的过程和条件，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题．

练习册系列答案
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下列关于人体细胞内“葡萄糖――→①丙酮酸――→②CO2”过程的叙述，正确的是 （ ）

A．①过程在活细胞中均可进行

B．②过程可产生ATP和[H]，也可能不产生ATP和[H]

C．②过程产生的二氧化碳中的碳和氧全部来自丙酮酸

D．①②过程是合成ATP所需能量的主要来源
2．用“样方法”调查蒲公英种群密度的过程是（　　）
①将某地分为10等份，在每份的中央划一个大小为1 m2的样方　②将某地分为10等份，在每份的中央划一个大小不同的样方　③计数每个样方内该种群数量，再计算平均值　④计数每个样方内该种群数量，相加获得总数值．
A．①③B．①④C．②③D．②④
19．产生图中物质④的场所是（　　）
A．线粒体外膜上B．细胞质基质内C．线粒体基质内D．线粒体内膜上
6．下列关于基因工程技术的相关叙述中，正确的是（　　）
A．基因工程是分子水平的操作，蛋白质工程是蛋白质水平的操作
B．质粒是基因工程中的重要工具酶之一
C．终止密码子的作用是阻碍RNA聚合酶的移动
D．真核细胞的基因中，编码区也含有不能编码蛋白质的序列
16．为研究乙烯影响植物根生长的机理，研究者以拟南芥幼苗为材料进行实验．
（1）乙烯和生长素都要通过与特异性受体结合，将信息（或“信号”）传递给靶细胞，从而调节植物的生命活动．
（2）实验一：研究者将拟南芥幼苗放在含不同浓度的ACC（乙烯前体，分解后产生乙烯）、IAA（生长素）的培养液中培养，测量并记录幼苗根伸长区细胞长度，结果如表．
组别植物激素及处理浓度（?M）根伸长区细胞长度（?m）
1对照175.1
20.20ACC108.1
30.05IAA91.1
40.20ACC+0.05IAA44.2
实验结果说明乙烯和生长素都能够抑制根生长，与单独处理相比较，两者共同作用时抑制作用增强．
（3）实验二：将拟南芥幼苗分别放在含有不同浓度ACC的培养液中培养，12h后测定幼苗根中生长素的含量，实验结果如图所示．据图分析，乙烯通过促进生长素含量增加来影响根生长．
（4）研究者将幼苗放在含NPA（生长素极性运输阻断剂）的培养液中培养，一段时间后，比较实验组和对照组幼苗根伸长区细胞长度，结果无显著差异．由此分析，研究者的目的是探究乙烯是否通过影响生长素的极性运输来影响根生长．
（5）综合上述各实验的结果可推测，乙烯影响根生长的作用最可能是通过促进生长素的
合成实现的．
3．表中表示的活性物质与其作用的细胞及其作用的结果不完全相符的是（　　）
组别活性物质相应细胞结果
①甲状腺激素几乎所有的体细胞物质分解代谢增强
②胰高血糖素肝脏细胞细胞内糖元水解
③抗原分子B细胞或记忆细胞细胞分裂、分化
④神经递质神经细胞、肌肉细胞细胞兴奋
A．①B．②C．③D．④
20．下列关于观察植物细胞有丝分裂实验的叙述，正确的是（　　）
A．解离的主要目的是用药液（解离液）将组织细胞杀死，以便固定细胞的形态
B．漂洗的主要目的是为了洗去药液，防止解离过度
C．龙胆紫或醋酸洋红溶液能使DNA着色
D．当看到一前期细胞时，要注意观察到它如何进入到中期、后期、末期的过程，以理解从中期到末期发生的变化
19．下列有关生物实验所用试剂及实验现象的叙述中正确的是（　　）
A．苏丹III染液可将花生子叶细胞中的脂肪颗粒染成橘黄色
B．健那绿可将活细胞中的线粒体染成绿色
C．蛋白质与双缩脲试剂在50〜65℃水浴条件下呈现紫色
D．在还原糖中加入斐林试剂立即出现砖红色沉淀

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