题目内容

(15分)Ⅰ.土壤农杆菌能将自身Ti质粒的T-DNA整合到植物染色体DNA上,诱发植物形成肿瘤。T-DNA中含有植物生长素合成酶基因(S)和细胞分裂素合成酶基因(R),如图1所示,它们的表达与否能影响相应植物激素的含量,进而调节肿瘤组织的生长与分化。基因工程常用Ti质粒作为运载体,图2表示抗虫棉培育中使用的三种限制酶A、B、C的识别序列以及Ti质粒上限制酶切割位点的分布,抗虫基因内部不含切割位点,两侧标明序列为切割区域。

(1)据图2分析,切取抗虫基因时,使用限制酶 ,切割Ti质粒时,使用限制酶 。

(2)成功建构的重组质粒含有限制酶A的识别位点 个,若用酶C处理该重组质粒,将得到 个DNA片段。

(3)若抗虫基因插入的位置在R基因内部,筛选出 植株即是成功导入抗虫基因的棉花植株。

Ⅱ.单克隆抗体技术在生物工程中占有重要地位。请回答相关问题:

(4)科学家米尔斯坦和柯勒提出单克隆抗体制备技术的实验方案:把一种 细胞与能在体外大量增殖的 细胞进行诱导融合,使融合细胞既能大量增殖,又能产生足够数量的特定抗体。

(5)在技术操作中,需要将融合细胞用 培养基进行筛选,并进行克隆化培养和 检测,以得到足够数量的符合要求的 (填“单”、“双”、“多”)核杂交瘤细胞。

(6)若将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,可从 中提取出大量的单克隆抗体。

(7)研究人员应用 ,改造了鼠源性抗体分子的结构,降低了鼠源性抗体的人体反应。

Ⅰ.(1)酶B和酶C 酶A和酶B (2)0(2分) 2(2分) (3)生根瘤

Ⅱ.(4)B淋巴 骨髓瘤 (5)特定的选择(不答“选择”不给分) 抗体检测 单

(6)(细胞)培养液 (7)蛋白质工程

【解析】

试题分析:

(1)分析图2可知,在目的基因的左侧只有B酶的识别位点,右侧只有C酶的识别位点;质粒上有A、B、C三种限制酶的识别位点,其中T-DNA上含有酶A和酶B的识别位点,所以切取抗虫基因时,使用限制酶B和酶C,切割Ti质粒时,使用限制酶A和酶B。

(2)导入的抗虫基因应在T-DNA上。酶A和酶C切割形成的黏性末端相同,使用酶B和酶C切取抗虫基因,使用酶A和酶B切割Ti质粒,再将二者用DNA连接酶连接形成重组质粒,成功建构的重组质粒含有0个限制酶A的识别位点,含有2个限制酶C的识别位点,因此若用酶C处理该重组质粒,将得到2个DNA片段。

(3)分析图1可知,若抗虫基因插入的位置在R基因内部,T-DNA中含有的S基因能表达,R基因的结构因遭到破坏而不能表达,导致植物生根瘤。所以筛选出生根瘤植株即是成功导入抗虫基因的棉花植株。

Ⅱ.(4)科学家米尔斯坦和柯勒提出单克隆抗体制备技术的实验方案:把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞进行诱导融合,使融合细胞既能大量增殖,又能产生足够数量的特定抗体。

(5)动物细胞融合后形成的是单核细胞。因细胞融合具有一定的随机性,因此需要在特定的选择培养基上筛选出融合的杂交瘤细胞,并进行克隆化培养和抗体检测,以得到足够数量的符合要求的单核杂交瘤细胞。

(6)若将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,可从(细胞)培养液中提取出大量的单克隆抗体。

(7)抗体的化学本质是蛋白质,若要改造鼠源性抗体分子的结构,应该使用蛋白质工程技术。

考点:本题考查基因工程、动物细胞融合、单克隆抗体的相关知识,意在考查学生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,能从题图中提取有效信息并运用所学知识与观点,通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理,做出合理的判断或得出正确结论能力。

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