Question

【题目】胡萝卜素是一种常见的食品添加剂，美国、日本等国通过转基因技术培有出一种黄金大米。如用将同时含有酶A、酶B、酶D这二种酶基因的表达载体导人水稱细跑.已知酶A基因来自细菌，酶B基因来自玉米，酶D基因来自其他植物，其中的酶A基因和酶B基因可使水稻胚乳富含β-胡麦卜素而呈现金黄色。请回答下列问题：

（1）酶A、B、D基因遗传信息不同的原因是___________________________________。

（2）科学家获取酶A、B、D基因的方法各不相同，酶A基因是通过PCR获得，该过程中DNA解旋需加热至_______℃；酶B基因是从cDNA文库中获得，cDNA文库和基因组文库相比，基因中_______(填“有”或“无”)启动子，酶D基因作为标记基因，其作用是_________________________。

（3）将含有这三种酶基因的表达载休导人受体细胞可用我国科学家独创的一种方法，该方法简便经济，此方法叫______________。

（4）要检测转基因生物的染色体DNA上星否插入了目的基因，检测方法采用______________技术用放射性同位素标记的DNA片段作为__________________，与基因组DNA结合，若结果显示出杂交带，表明目的基因已插入染色体DNA中。

（5）成功导入上述基因的水稻细胞可通过植物组织培养技术获得幼苗，在组织培养实验中，为什么要强调相关材料，器具的灭菌以及无菌操作？___________________________________。

Answer 1

【答案】脱氧核苷酸（碱基）的（数量）排列顺序不同 90～95 无 鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来 花粉管通道法 DNA分子杂交（分子杂交） 探针 杂菌消耗培养基营养物质，并产生对培养物有害的物质，导致培养物迅速死亡

【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）遗传信息是指，DNA分子中特定的碱基序列。

（2）PCR技术解旋的温度为90～95℃；cDNA是通过逆转录而来，无启动子和终止子序列；标记基因的作用主要是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

（3）我国科学家独创的一种导入方法是花粉管通道法。

（4）检测目的基因常用DNA分子探针，通过DNA分子杂交技术，观察是否出现杂交带。

（5）植物组织培养过程一定要无菌，否则会因为杂菌污染消耗培养基的营养物质或产生有害物质，导致培养物死亡。