题目内容

【题目】微生物脂肪醇已经成为脂肪酶工业生产的主要来源,某小组从食品中筛选得到了产脂肪酶的黑曲霉菌株。请回答下列问题

(1)在培养黑曲霉菌的培养基中加入一定量的植物油,其作用是___________________。

(2)高纯度的酶能显菪提高催化效率,脂肪酶的化学本质是蛋白质,实验室常采用以下方法分离纯化脂肪酶。

①凝胶色谱法:用此法分离蛋白质时,相对分子质量______的蛋白质先从层析柱中洗脱出来。其原理是__________________________。

②电冰法:可以根据脂肪酶和其他蛋白质分子的____________(等差异),产生不同的迁移速度,从而分离脂肪酶。SDS可以使蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速率完全取决于______。

(3)工业生产过程中,可将脂肪酶固定在一定的区域内,固定脂肪酶一般采用的方法是____。固定化脂肪酶的优点是_______________________。

【答案】为黑曲霉菌提供碳源 较大 相对分子质量较大的蛋白质不能进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外移动,路程较短,移动速度较快 带电性质的差异、分子大小和形状不同 分子的大小 物理吸附法或化学结合法 容易与反应物分离和结合、可重复利用

【解析】

①固定化酶技术的应用

a、固定化酶:固定化酶是指用物理学或化学的方法将酶与固相载体结合在一起形成的仍具有酶活性的酶复合物。在催化反应中,它以固相状态作用于底物,反应完成后,容易与水溶性反应物和产物分离,可被反复使用。

b、制备固定化酶:目前,制备固定化酶的方法主要有吸附法、交联法、包埋法等。吸附法的显著特点是工艺简便且条件温和,在生产实践中应用广泛;交联法是利用多功能试剂进行酶与载体之间的交联,在酶和多功能试剂之间形成共价键,从而得到三维的交联网架结构;包埋法是将酶包埋在能固化的载体中。

c、应用:固定化酶已被广泛地应用在人们的日常生活、医院、工业等方面。例如,固定化酶在新型青霉素的生产中具有重要作用。

②固定化细胞技术的应用

a、固定化细胞技术:通过各种方法将细胞与一定的载体结合,使其仍保持原有的生物活性,这一过程称为细胞固定化。

b、细胞固定化的方法:

1、吸附法:是制备固定化动物细胞的主要方法,此法也可制备固定化植物细胞,它既可将植物细胞吸附在泡沫塑料的大孔隙或裂缝之中,也可将植物细胞吸附在中空纤维的外壁上;

2、包埋法:是指将细胞包埋在多空载体的内部而制成固定化细胞的方法。其中,凝胶包埋法是应用最广泛的细胞固定化方法,它所使用的载体主要有琼脂、海藻酸钠凝胶、角叉菜胶、明胶等。

c、固定化细胞技术的优点:可以取代游离的细胞进行发酵,生产各种物质。

(1)在培养黑曲霉菌的培养基中加入一定量的植物油的作用是为黑曲霉菌提供碳源。

(2)①用凝胶色谱法分离蛋白质时,相对分子质量较大的蛋白质先从层析柱中洗脱出来。其原理是相对分子质量较大的蛋白质不能进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外移动,路程较短,移动速度较快。

②利用电泳法分离蛋白质,可以根据脂肪酶和其他蛋白质分子的带电性质的差异,分子大小和形状不同,产生不同的迁移速度,从而分离脂肪酶。SDS可以使蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速率完全取决于分子的大小。

(3)工业生产过程中,可将脂肪酶固定在一定的区域内,固定脂肪酶一般采用的方法是物理吸附法或化学结合法,固定化脂肪酶的优点是容易与反应物分离和结合、可重复利用。

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