题目内容
【题目】白僵菌可感染农业害虫，常作为防治害虫的菌剂。由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感，且杀死害虫的能力较弱，科研人员对其进行基因工程改造，流程如图所示。
（1）苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白能有效杀死害虫。从苏云金芽孢杆菌中获取毒蛋白基因，通过PCR技术可在体外大量扩增。该扩增过程需要________种引物，所需添加的酶是________。
（2）将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒1的过程需要用到的限制酶是________，其作用是破坏DNA分子中的________键。
（3）重组质粒1和Bar基因（草丁膦抗性基因）各自用Xba I酶处理，得到酶切片段。重组质粒1的酶切片段再用去磷酸化酶处理，使末端游离的磷酸基团脱离，目的是防止__________。
（4）将重组质粒2导入经_______处理成为感受态的白僵菌，一段时间后用含有_______的平板培养基进行筛选，获得含有Bar基因的重组白僵菌。
（5）科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上，以此饲喂饥饿处理的害虫，记录单位时间内的_____，以判断重组白僵菌的杀虫效果。
（6）分析利用基因工程获得的重组白僵菌对生态环境可能造成的影响：_____________。
【答案】两 耐高温的DNA聚合酶（Taq酶） Nco I、 BamH I 磷酸二酯 重组质粒1酶切片段自身连接（或“相互连接”） Ca2+ (CaCl2 ) 草丁膦 死亡害虫数 有利：可以减少害虫数量;提供农业产量;减少农药使用量等 有害：可能扩散到自然界中,破坏生态平衡;也可能造成基因污染;或成为优势物种,威胁生态系统中其他生物的生存等
【解析】
PCR技术扩增目的基因
（1）原理：DNA双链复制
（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。
（1）根据题意可知，可以用PCR技术体外获得大量毒蛋白基因片段，该扩增过程需要2种引物与两条母链配对，并需要热稳定性DNA聚合酶，因为扩增的第三步需要加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。
（2）据图分析，毒蛋白基因两端是NcoI、BamHI作用位点，因此需要NcoI、BamHI将毒蛋白基因和质粒切割，另需要DNA连接酶连接，获得重组质粒l，限制酶作用的对象是切断磷酸二酯键。
（3）在用一种限制酶处理质粒和草丁膦抗性基因时，由于产生的末端相同，有可能发生自身环化（连接），因此重组质粒1的酶切片段再用去磷酸化酶处理，使末端游离的磷酸基团脱离，防止重组质粒1酶切片段自身连接。
（4）将重组质粒2与用钙离子处理处于感受态的白僵菌菌液混合进行转化，重组质粒2在白僵菌细胞内被修复，一段时间后用含有草丁膦的平板培养基进行筛选，获得含有Bar基因的重组白僵菌。
（5）科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上，以此饲喂饥饿处理的害虫，记录单位时间内的死亡害虫数，以判断重组白僵菌的杀虫效果。
（6）分析利用基因工程获得的重组白僵菌对生态环境可能造成的影响：
有利：可以减少害虫数量；提供农业产量；减少农药使用量等。
有害：可能扩散到自然界中，破坏生态平衡；也可能造成基因污染；或成为优势物种，威胁生态系统中其他生物的生存等。
【题目】某生物兴趣小组调查人群中某单基因遗传病发病率时获取如表所示数据，下列叙述中正确的（ ）
调查性别 | 男性 | 女性 |
调查人数 | A | B |
患者人数 | a | b |
A.此遗传病在人群中发病率表示为
，在男性中发病率表示为
B.若此单基因遗传病由显性基因控制，则与
必然相等
C.若控制此遗传病的基因只位于X染色体上，则
必然小于
D.若此遗传病为抗维生素D佝偻病，则大于
