题目内容
干扰素在人体中是由免疫细胞合成并分泌的一种糖蛋白,几乎能抵御所有病毒引起的感染。传统生产方法成本高、产量低,获得的干扰素在体外不易保存。用生物技术手段可以缓解这些问题。请回答相关问题。
(1)利用基因工程生产干扰素,过程是:
①从健康人体的外周静脉血分离能合成干扰素的免疫细胞,从中提取 ,经反转录获取目的基因。
②用限制酶处理载体和目的基因后,用DNA连接酶处理,形成基因表达载体,该载体的化学本质是 。
③若选择大肠杆菌作为受体细胞,常用的转化方法是用Ca2+ 处理,使其成为 ,
在一定温度条件下完成转化。
④在培养液中培养一段时间后,离心后取 (答“上清液”或“菌体”),经进一步处理获得产物,进行产物鉴定时可采用 技术。
(2)利用蛋白质工程对干扰素进行改造,基本途径是:
预期蛋白质功能→ → →找到对应的脱氧核苷酸序列。
(3)利用细胞工程生产干扰素,设计思路是:将相应免疫细胞和瘤细胞融合,筛选出______ ___,经细胞培养可获得大量干扰素。
(1)①mRNA(2分) ②DNA(1分) ③感受态细胞(2分) ④菌体(2分) 抗原抗体杂交(2分)
(2)设计预期蛋白质结构(2分) 推测氨基酸序列(2分)
(3)杂交瘤细胞(2分)
解析试题分析:(1)反转录是以RNA为模板,通过反转录酶,合成DNA的过程。从免疫细胞中提取的是mRNA。载体是将目的基因转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子,最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。将目的基因导入微生物细胞,最常用的是大肠杆菌,其转化方法是:先用Ca2+ 处理,使其成为感受态细胞,再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态ibao吸收DNA分子,完成转化过程。培养一段时间后,离心后取菌体,经进一步处理获得产物,鉴定采用技术是抗原抗体杂交。(2)蛋白质工程的流程是:预期蛋白质功能→设计预期蛋白质结构→推测氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列。(3)动物细胞融合技术中,细胞融合后会出现多种融合细胞,需要经过选择性培养基筛选出所需要的杂交瘤细胞。
考点:本题考查基因工程,蛋白质工程和细胞工程的相关知识,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。