Question

6．某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一起．请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的实验步骤，并回答有关问题：
（1）主要步骤：
①制备两种培养基：一种是无氮培养基，另一种加青霉素的培养基．分别分成两份，依次标上A、A′和B、B′，备用．
②分别向A、B培养基中接种混合菌．
③接种后，放在恒温箱中培养3～4天．
④分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种，接种到A′、B′培养基中．
⑤接种后，把A′、B′培养基放入恒温箱中培养3～4天．
（2）回答问题：
第④⑤两个步骤的目的是获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌．
在步骤①中，为保证无杂菌污染，实验中应采用的主要措施有培养基高压蒸气灭菌、接种环在酒精灯火焰上灭菌、接种过程在酒精灯火焰附近进行．

Answer 1

分析 圆褐固氮菌（原核生物）与酵母菌（真核生物），在结构上的主要差异为圆褐固氮菌无成形的细胞核．
圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培养条件下生长繁殖而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖．

解答 解：（1）将微生物进行分离一般采用选择培养基．选择培养基是在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长．圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培养基上生长繁殖，而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖．根据这一原理可将两种微生物分离开来．
（2）在微生物培养过程中的灭菌措施有：培养基和培养皿的高压蒸气灭菌、金属用具的灼烧灭菌、接种过程在酒精灯火焰附近进行等．为获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌，可以用选择培养基重复进行选择培养．
故答案为：
（1）无氮   加青霉素   混合菌
（2）获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌    
培养基高压蒸气灭菌    接种环在酒精灯火焰上灭菌    接种过程在酒精灯火焰附近进行

点评 本题难度适中，属于考纲中识记、理解层次的要求，着重考查了微生物的分离与培养的相关知识，解答本题的关键是根据不同微生物的特点选择恰当的培养基．