Question

基因工程又叫基因拼接技术．
（1）在该技术中，切割DNA的工具是限制酶，它能识别某一特定核苷酸序列，使两个核苷酸之间的

 

断开．限制酶切割产生的DNA片段末端有两种形式，分别是

 

、

 

．
（2）基因工程中常用“分子缝合针”是连接酶，根据酶的来源不同可分为

 

、

 

 两类，其中前者只可以连接

 

，后者既可以连接

 

也可以连接

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：1、限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，因此一种限制酶只能识别特定的碱基序列和切割一定的位点．
2、DNA连接酶根据酶的来源不同分为两类：E?coli连接酶、T₄DNA连接酶．这二者都能连接黏性末端，此外T₄DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低．DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．

解答： 解：（1）在该技术中，切割DNA的工具是限制酶，它能识别某一特定核苷酸序列，使两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开．限制酶切割产生的DNA片段末端有两种形式，分别是黏性末端、平末端．
（2）基因工程中常用“分子缝合针”是连接酶，根据酶的来源不同可分为E?coli连接酶、T₄DNA连接酶两类，其中前者只可以连接黏性末端，后者既可以连接黏性末端，也可以连接平末端．
故答案为：
（1）磷酸二酯键         黏性末端           平末端
（2）E?coli连接酶      T₄DNA连接酶       黏性末端       黏性末端      平末端

点评：本题主要考查学生对基础知识的记忆和理解能力．题目中考查的主要是基因工程的两种工具酶．基因工程是考查的重点知识，与细胞工程、胚胎工程等现代生物技术都有一定联系．复习时可以建立知识框架，帮助记忆和理解．要注意，获取目的基因和切割载体时使用同种限制酶，目的是产生相同的黏性末端．获取一个目的基因需限制酶剪切两次，共产生 4个黏性末端或平末端．限制酶切割位点的选择必须保证标记基因的完整性，以便于检测．