5.下面是生物研究小组对4 种不同品牌腐乳产蛋白酶菌株进行筛选的方案,请协助完成方案,并回答有关问题:
【实验原理】在固体培养基中加入溶解性差、但可被微生物利用的酪蛋白可以形成浑浊、不透明的培养基背景.当培养基中的酪蛋白被微生物分泌的蛋白酶分解后,在菌落(沉淀圈)的周围就会形成透明圈(如图1).透明圈的大小反映了菌落利用蛋白质的能力.

【材料与试剂】4种品牌的豆腐乳(编号品牌1、2、3、4)
【主要仪器与设备】恒温水浴锅、培养箱、高压灭菌锅等
【实验方法】
Ⅰ、制备固体平板培养基:计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板.
Ⅱ、运用稀释涂布平板法分离纯化菌株:分别梯度稀释制备4种腐乳的菌悬液,吸取少量的菌悬液,注入培养基平板中,涂布均匀.然后置于温度28℃的恒温箱中,培养36h.
Ⅲ、初筛菌种:从上一步培养基平板上挑选单细胞菌落,分别接种于筛选培养基中,在28℃下培养48h.挑选透明圈大而沉淀圈小的菌株,作为初筛菌株.
回答下列问题:
(1)补全“制备微生物固体培养基”的主要操作步骤①灭菌,②倒平板.
(2)“菌落”在生态学上属于种群层次的生命系统,“稀释涂布平板法”纯化菌种的原理是在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将分散成单个细胞,从而能够在培养基表面形成单个的菌落.在进行菌种纯化时,还可以采用平板划线法进行.
(3)初筛菌株的菌落周围“透明圈大”说明沉淀圈中的微生物分泌的蛋白酶活性越高.
(4)研究人员将初筛菌株接种于发酵液中,在适宜条件下培养,并每隔一定时间取样检测发酵液中蛋白酶的活性,结果如图2:
根据曲线可知,在培养的早期,各品牌菌种发酵液中蛋白酶活性都迅速升高,这可能与时间有关,研究中最好选择哪一品牌的菌种作为高产蛋白酶的菌株品牌1.

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