Question

4．农作物秸秆除了作为动物饲料，还可用于微生物发酵，获得燃料乙醇．回答下列问题：
（1）纤维素分解菌能分泌纤维素酶，因此常用于作物秸秆的初期处理．纤维素酶主要包括的三种组分是C₁酶、C_x酶、葡萄糖苷酶，其中能将纤维二糖分解成葡萄糖的是葡萄糖苷酶．
（2）通常在的地方采集土样，用于实验室中分离纤维素分解菌，筛选纤维素分解菌时常采用刚果红染色法，这种方法能够通过颜色反应来对微生物进行筛选．
（3）若要对用于后期发酵的酵母菌进行计数，可在显微镜下用直接计数；若要测定活菌数量，可选用稀释涂布平板法法进行计数．某同学用0.1mL稀释液在稀释倍数为10⁵的平板中测得菌落数的平均值为112，则每毫升样品中的细菌数是1.12×10⁸个．

Answer 1

分析 1、纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少含有三种组分，即C₁酶、C_x酶、葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖．
2、在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌．
3、统计菌落数目的方法
（1）显微镜直接计数法
 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌．
（2）间接计数法（活菌计数法）
 ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌．
②操作
a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性．
b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数．
③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数．

解答 解：（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少含有三种组分，即C₁酶、C_x酶、葡萄糖苷酶，其中的C₁酶和C_x酶使纤维素分解成纤维二糖，葡萄糖苷酶将纤维二糖分解成葡萄糖．
（2）刚果红与纤维素形成的红色复合物在纤维素被分解后将不再形成，则在培养基上出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，因此筛选纤维素分解菌时常采用刚果红染色法．
（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数；若要测定其活菌数量，可选用稀释涂布平板法进行计数．某同学用0.1mL稀释液在稀释倍数为10⁵的平板中测得菌落数的平均值为112，则每毫升样品中的细菌数是112×10⁵×10=1.12×10⁸个．
故答案为：
（1）C₁酶、C_x酶、葡萄糖苷酶         葡萄糖苷酶
（2）刚果红染色
（3）稀释涂布平板法      1.12×10⁸

点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记纤维素酶的组成及功能；识记筛选分解纤维素的微生物的方法；识记接种微生物常用的两种方法．