Question

【题目】家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。将干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。请回答下列问题：

（1）进行转基因操作前，需将获得的幼蚕组织先_____________，并用_____________酶短时处理以便获得单个细胞。

（2）在培养获得的单个细胞时，为避免杂菌污染，除对培养液和用具进行无菌处理以外，还应在培养液中添加一定的_______________。培养过程中，发现贴壁细胞分裂生长到相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，此现象称为_____________________。

（3）将干扰素基因导入培养的家蚕细胞时，需要运载体协助，而运载体一般不选择_________(噬菌体、昆虫病毒)，原因是________________________________。

（4）导入成功后，若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否成功表达，可以采用的方法是___________。

Answer 1

【答案】剪碎 胰蛋白酶 抗生素 接触抑制 噬菌体 噬菌体的宿主细胞是细菌而不是家蚕 抗原-抗体杂交技术

【解析】

本题考查细胞工程、基因工程，考查对动物细胞培养技术、基因工程操作程序的理解和识记。根据基因工程中受体细胞的种类可选择适宜的运载体。

（1）将获得的幼蚕组织剪碎，并用胰蛋白酶短时处理，水解细胞间的胶原蛋白，可以制备单细胞悬液。

（2）在动物细胞培养过程中，为避免杂菌污染，除对培养液和用具进行无菌处理以外，还应在培养液中添加一定的抗生素，抑制杂菌生长。培养过程中，细胞具有贴壁生长、接触抑制的特点。

（3）噬菌体只能侵染细菌，将干扰素基因导入培养的家蚕细胞时，应选择昆虫病毒，而不能选择噬菌体。

（4）检测干扰素基因在家蚕细胞中是否成功表达，可制备家蚕细胞匀浆，用抗原—抗体杂交方法，检测是否有杂交带出现。