题目内容
【题目】
38.[生物——选修3:现代生物科技专题](15分)
编码蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五个片段组成,编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成,如图1所示。
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回答下列问题:
(1)先要通过基因工程的方法获得蛋白乙,若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA),则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙,原因是_____________________________________.
(2)某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中,在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等,还加入了序列甲作为_____________________,加入了________________作为合成DNA的原料。
(3)现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白,要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用,某同学做了如下实验:将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组,其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一组作为对照,培养并定期检测T淋巴细胞浓度,结果如图2。
①由图2 可知,当细胞浓度达到a时,添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加,此时若要使T淋巴细胞继续增殖,可采用的方法是__________________。细胞培养过程中,培养箱中通常要维持一定的C2O浓度,C2O的作用是__________________。
②仅根据图、图2可知,上述甲、乙、丙三种蛋白中,若缺少______________(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所编码的肽段,则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。
【答案】(1)编码乙的DNA序列起始端无ATG,转录出的mRNA无起始密码子
(2)模板 dNTP
(3)①进行细胞传代培养 维持培养液是的pH ② C
【解析】(1)题干信息基因序列(TTCG……),可知其转录出的mRNA上没有起始密码子AUG。
(2)根据PCR的条件需要,引物、耐高温DNA聚合酶、模板、四种脱氧核糖核苷酸作为原料。
(3)T细胞浓度之所以不增加是因为营养物质耗尽,所以可以更换培养液,补充营养物质;CO2作用为课本基础知识。
(4)据图分析,丙与对照接近说明BD片段重要性较弱,甲和乙都有较大影响,他们中共同的片段是C,所以缺少C片段会降低效果。