Question

16．请回答相关问题：
（1）利用月季的花药离体培养产生单倍体时，选材非常重要．为了选择适宜时期的花药，通常选择完全未开放的花蕾，确定花粉发育时期常用的方法有醋酸洋红法，但是对于花粉细胞核不易着色的植物，需采用焙花青铬矾法，该法能将花粉细胞核染成蓝黑色．
（2）消毒后的花蕾，在剥离花药时，要彻底去除花丝，这是因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成
（3）对外植体进行表面消毒时，既要考虑药剂 的消毒效果，又要考虑植物的耐受能力．对培养基和其他器械进行灭菌的方式是高压蒸汽灭菌．进行菊花组织培养，温度控制在18～22度，并且每日用日光灯照射12h．
（4）若要进行兰花无病毒植株的培育，首先选择兰花的茎尖分生组织作为外植体．进行组织培养需配制MS培养基，在该培养基中常需要添加生长素和细胞分裂素等激素．欲利于根的分化，植物激素的用量比例应为生长素多于细胞分裂素．

Answer 1

分析 植物组织培养依据的原理是细胞的全能性．培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽最终形成植物体．影响植物细胞脱分化产生愈伤组织的一个重要因素是植物激素．植物激素中细胞分裂素和生长素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素．生长素和细胞分裂素的比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长．

解答 解：（1）材料的选择是花粉植株能否培养成功的主要影响因素之一，同一植物的不同生理状况诱导成功率都不相同，选择月季花粉的最佳时期为完全未开放的花蕾．确定花粉发育时期最常用的方法是醋酸洋红法，但是对于花粉细胞核不易着色的植物，需采用焙花青-铬矾法，焙花青-铬矾法蓝黑色．
（2）灭菌后的花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，由于与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成，所以在剥离花药时，既要彻底除去花丝，又要尽量不要损伤花药．
（3）无菌技术是植物组织培养的关键，一般使用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌；外植体消毒一般采用70%的酒精和0.1%的氯化汞溶液处理，但处理既要考虑药剂的消毒效果，又要考虑植物的耐受能力．进行菊花组织培养条件是：一般将pH控制在5.8左右，温度控制在18至22℃，并每天光照12h．
（4）若要进行兰花无病毒植株的培育，首先选择兰花茎尖分生组织作为外植体．原因是该部位含病毒少，甚至无病毒．植物组织培养过程中，生长素和细胞分裂素能促进细胞分裂分化，在培养的不同时期对两者的比例会有不同要求，在再分化过程中，生长素高，促进根的分化，细胞分裂素比例高，促进芽的分化．
故答案为：
（1）完全未开放   　醋酸洋红    焙花青铬矾　  蓝黑  
（2）与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成  
（3）药剂  植物的耐受能力   高压蒸汽灭菌    18～22   12
（4）茎尖分生组织　　  生长素多于细胞分裂素

点评 本题主要考查学生对植物组织培养相关知识的记忆和理解能力．在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，需要的条件：①消毒灭菌；②一定浓度的植物激素；③适宜的温度；④充足的养料．植物组织培养中植物激素使用：物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素；同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂也分化．消毒和灭菌：外植体可以用酒精消毒；操作前手需用酒精消毒；培养基需用高压蒸汽灭菌．