题目内容

15．以小鼠为对象进行下列各项研究工作，请分析回答问题．
（1）在小鼠体细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长时会出现接触抑制现象而停止分裂增殖，此时瓶壁上形成细胞层数是单层（或一层）．
（2）体外受精之后，精核与卵核融合之前，用微型吸管除去雄核，再用细胞松弛素B处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小鼠．这种方法在动物新品种选育中的显著优点是缩短获得纯合体的时间．
（3）培育转基因小鼠时，通常以受精卵作受体细胞，为使外源基因在后代中长期保持，可将转基因小鼠体细胞的细胞核转入去核卵母细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体．
（4）动物细胞培养过程中添加抗生素来防治污染；若保存细胞，通常在液氮（或冷冻）条件下，因为在这种条件下，细胞中酶的活性降低，细胞代谢速率降低．
（5）单克隆抗体的制备中，首先需向小鼠注射相应的抗原，以产生相应的效应B细胞，让该细胞与骨髓瘤细胞融合，融合后经选择培养得到的杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选可获得杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔，从腹水中获得特异抗体，这种细胞的特点是既能产生特异性抗体又能无限增殖．

分析 1、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养．
2、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁．细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制．
3、体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精．动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，核移植得到的动物称克隆动物．
4、单克隆抗体的制备流程：人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，通过培养获得的杂交瘤细胞得到单克隆抗体．

解答 解：（1）在小鼠体细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长时会出现接触抑制现象而停止分裂增殖，此时瓶壁上形成细胞层数是单层（或一层）．
（2）处理后的受精卵由于只有雌核，而细胞松弛素B处理作用类似于用秋水仙素处理植物细胞，所以处理后的受精卵染色体数目将加倍，这种方法在动物新品种选育中的显著优点是容易获得纯合子并缩短育种时间（同植物的单倍体育种）．
（3）培育转基因小鼠时，通常以受精卵作受体细胞，为使外源基因在后代中长期保持，可将转基因小鼠体细胞的细胞核转入去核卵母细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体．
（4）动物细胞培养过程中添加抗生素来防治污染；若保存细胞，通常在液氮（或冷冻）条件下，因为在这种条件下，细胞中酶的活性降低，细胞代谢速率降低．
（3）单克隆抗体的制备中，首先需向小鼠注射相应的抗原，以产生相应的效应B细胞，让该细胞与骨髓瘤细胞融合，融合后经选择培养得到的杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选可获得杂交瘤细胞，将产生特异抗体的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔，从腹水中获得特异抗体，杂交瘤细胞的特点是：既能产生特异性抗体又能无限增殖
故答案为：
（1）接触抑制   单层（或一层）     
（2）缩短获得纯合体的时间
（3）受精卵    细胞核   去核卵母   
（4）抗生素       酶
（5）相应的抗原     克隆化培养    抗体检测       杂交瘤细胞    既能产生特异性抗体又能无限增殖

点评 本题综合考查动物细胞培养、核移植和单克隆抗体的相关知识，重点考查动物细胞培养的相关内容，要求考生识记动物细胞培养的过程、条件和应用等知识，能灵活的运用所学的知识解答问题．动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和pH；④气体环境：95%空气+5%CO2．

练习册系列答案
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5．微生物与人类关系密切．下表为培养某种微生物的培养基配方，请回答有关问题：
KH2PO4Na2HPO4MgSO4•7H2O硝酸铵琼脂
1.4g2.1g0.2g1.0g15.0g
（1）从此培养基的配方来看，最适合培养下列哪种微生物？B
A．酵母菌    B．硝化细菌   C．纤维素分解菌   D．大肠杆菌
（2）该培养基按照功能来分属于选择培养基，培养基的配方中一般都含有水、碳源、氮源
和无机盐，培养基还需要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求．
（3）稀释涂布平板法是微生物接种常用的方法之一，该法是将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布在琼脂固体培养基的表面，进行培养．在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落．
（4）如果要进行土壤中分解尿素的细菌的分离，培养基中必须含有的成分是尿素，验证分解尿素的细菌是否存在，常用的方法是培养基中加入酚红试剂，若变红则说明存在分解尿素的细菌．
（5）微生物接种的方法很多，在用平板划线法操作结束时，为什么仍需要灼烧接种环？杀死接种环上的细菌，避免对环境造成污染．
6．糖尿病有I型，II型和III型之分，其中III型的主要特点是脑内胰岛素受体的敏感性降低，出现胰岛素抵抗，同时伴有脑内胰岛素水平下降，对维持神经元存活起重要作用的胰岛素样生长因子-1（IGF-1）及其受体水平也降低．而这些机制也导致了脑内神经元死亡，进而加重阿尔兹海默症．下列叙述正确的是（　　）
A．每分子胰岛素都能多次用于调节细胞膜对葡萄糖的转运速率
B．因IGF-1及其受体水平降低，致使脑内神经元的死亡，属于细胞凋亡
C．糖尿病患者的血糖浓度较高，诱导抗利尿激素的分泌，导致多尿症状
D．人体内，含胰岛素信使RNA和含胰岛素受体基因的细胞数量差异较大
3．下列关于转基因生物的研究，哪些属于限制条件（　　）
①重组DNA的转移限制在遗传上具有特定缺陷的生物上　②对于大肠杆菌作为转基因受体的菌株，限定必须使用在37℃人体体温下死亡的菌株　③外源DNA不能产生对人体有毒害或过敏的蛋白质　④转基因作物只要某一点（如产量、营养或抗虫性）对人类有益，其他方面可不必去考虑．
A．①②③④B．①②③C．②③④D．①②④
10．两株高茎豌豆杂交，子代都是高茎豌豆，则其亲本的遗传因子组合不可能是（　　）
A．DD×DDB．DD×DdC．Dd×DDD．Dd×Dd
20．草原是绿色生态环境的重要组成部分．某草原生态系统的食物网如图所示．

（1）图中食物网较简单，因此，该草原生态系统的自我调节能力较差，其抵抗力稳定性也相应较低．除图中所示的生物类群外，该生态系统的生物组成成分还应有分解者才能保证其物质循环的正常进行．
（2）如果图中草能提供50 00kJ的能量，营养级间的能量传递效率为10%～20%，那么鹰占据的营养级能够得到的最低和最高能量值分别是5kJ和200kJ．若去除蛇，且狐的数量不变，则草原容纳鹰的数量会增加．若外来生物入侵该区，则会导致该草原的生物多样性（或物种多样性）锐减或丧失．
（3）影响图中兔种群数量变化的种间因素是捕食和竞争．若某年兔种群的K值为800只，且1只兔和4只鼠消耗的草量相等，其他条件不变的情况下，次年鼠的数量增加400只，则兔种群的K值变为700只．用标志重捕法调查该区鼠的种群数量时，若部分标记个体迁出，则导致调查结果偏高（填“偏高”或“偏低”）．
（4）草原干旱时，兔摄取水分减少，体内细胞外液渗透压升高，引起下丘脑渗透压感受器兴奋，增加抗利尿激素的释放，进而引起肾小管、集合管对水的重吸收增加，减少排尿量，以保持体内水平．
7．下列说法错误的是（　　）
①正常情况下，生物体的根本能源、主要能源物质、储备能源物质、直接能源物质分别是光能、糖类、蛋白质、ATP；
②用18O标记氧，供给有氧呼吸，发现在产生的水中含18O；
③有氧呼吸、无氧呼吸和光合作用过程中都有能量的转化，但是只有绿色植物可以利用光能；
④人体中的激素、维生素和酶都是人体细胞产生的；
⑤同一个体内各类活细胞所含的酶种类和数量相同；
⑥动物和人体内，形成ATP的途径主要是细胞呼吸； 
⑦每克脂肪氧化放能多于每克糖类的主要原因是脂肪分子中含O比例高．
A．①④⑥⑦B．①③④⑤⑦C．①③⑤D．④⑤⑥⑦
4．如图表示下列名词的关系图．其中1、2、3分别是（　　）
A．原核生物、念珠藻、细菌B．细胞、病毒、原核细胞
C．蛋白质、DNA、血红蛋白D．脱氧核糖核酸、核糖核酸、核酸
5．图甲所示的调节过程是人体稳态的重要组成部分，图乙为细胞间信息传递的几种模式示意图，图丙是图乙局部结构的放大图，请据图回答以下问题：

（1）图甲中①代表促甲状腺激素释放激素，正常人血液中②的含量变化对①、③的分泌起调节作用，此中调控机制属于负反馈调节．
（2）在寒冷环境中，图甲中的②分泌量增加的同时肾上腺的分泌量也增加，二者共同促进机体的新陈代谢，二者与靶细胞结合起作用后被灭活．
（3）图甲中的胰岛A细胞、胰岛B细胞分别分泌胰高血糖素和胰岛素，它们的作用相互拮抗，共同维持血糖含量的稳定．
（4）若图乙中细胞3受到刺激产生兴奋，兴奋部位膜外电位的变化是由正电位变为负电位；兴奋在细胞3和细胞2间传递的结构如图丙所示，图丙②中的液体为组织液．

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