Question

植物基因工程技术主要用于提高农作物的抗逆能力．下图是利用质粒（有抗四环素基因、抗氨苄青霉素基因和SalⅠ、BamHⅡ、HindⅢ三种限制酶切割位点）获得转基因抗盐烟草的培育过程，请据图回答有关问题．

（1）将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状的产生所依据的原理是

 

．从基因文库中获得的抗盐基因可用

 

技术进行扩增．
（2）如果将抗盐基因直接导入烟草细胞，一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能

 

，也不能合成抗盐基因的mRNA．
（3）为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的

 

作探针进行分子杂交检测，又要用一定浓度的盐水浇灌的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性．
（4）在构建重组质粒时，为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，需用

 

限制酶对质粒和

 

进行切割．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：分析图解：图示为转基因抗盐烟草的培育过程，首先构建基因表达载体；其次采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞（烟草细胞）；再采用植物组织培养技术将含有目的基因的烟草细胞培养成转基因抗盐烟草．图中过程①表示植物组织培养的脱分化过程，过程②表示再分化过程．

解答： 解：（1）基因工程的原理是基因重组．从基因文库中获得的目的基因可用PCR技术进行扩增．
（2）将抗盐基因直接导入烟草细胞，一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能复制，也不能表达，即不能转录和翻译成相应的蛋白质．
（3）探针是指用放射性同位素标记的目的基因（抗盐基因）．为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的抗盐基因作探针进行分子杂交检测，又要用一定浓度的盐水浇灌的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性．
（4）质粒和含有目的基因的外源DNA分子上都含有SalI、Hindm、BamHI三种限制酶切割位点，其中BamHI的切割位点位于目的基因上，用该酶切割会破坏目的基因；若只用SalI一种限制酶切割可能会导致目的基因与运载体反向连接；因此在构建重组质粒时，应选用SalI和HindIII两种限制酶对质粒和抗盐基因进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性．
故答案为：
（1）基因重组       PCR 
（2）复制
（3）抗盐基因
（4）Sal I和Hind III     含抗盐基因的DNA

点评：本题结合转基因抗盐烟草的培育过程图，考查基因工程、植物组织培养等知识，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤，能根据图中限制酶的位置及题干要求选择正确的限制酶；掌握目的基因检测和鉴定的方法等．