Question

16．1963年诺和诺德公司向洗涤剂中加入碱性蛋白酶，推出了第一款加酶洗衣粉．碱性蛋白酶一般利用枯草芽孢杆菌生产．图甲、乙为某科研小组对碱性蛋白酶相关性质进行测试的结果．图丙、丁为两种常见的平板划线法；连续划线法和四区划线法，前者适用于纯化菌种较少的样品，后者适用于纯化菌种较多的样品．请回答下列问题：

（1）由图甲、乙可知，碱性蛋白酶发挥作用的适宜条件为pH为10.2左右和43℃左右的温度．
（2）图丁中依次进行四区划线，四区的面积要求为C＜D＜E＜F，F区面积最大的原因是使该区出现大量的单菌落以供挑选纯种用（或便于菌种分散）．每次划线后都要灼烧接种环，注意F区划线不要与C（C、D）（填字母）区相连．
（3）某兴趣小组欲从土壤中分离枯草芽孢杆菌，宜选择图丁所示的方法划线培养，分离得到的纯化单菌落属于种群（填“种群”或“群落”）．
（4）碱性蛋白酶是枯草芽孢杆菌生长后期向细胞外分泌的一种酶，与该酶合成有关的细胞器是核糖体．若欲应用固定化技术提高该酶的利用率，减少产物中的杂质，则应采用化学结合或物理吸附法方法．

Answer 1

分析 据图分析：图甲中，碱性蛋白酶的最适pH为10.2左右，图乙中碱性蛋白酶的最适温度为43℃左右．图丙、丁为两种常见的平板划线法；连续划线法和四区划线法，前者适用于纯化菌种较少的样品，后者适用于纯化菌种较多的样品．据此分析作答．

解答 解：（1）图甲中，碱性蛋白酶的最适pH为10.2左右，图乙中碱性蛋白酶的最适温度为43℃左右．
（2）由于通过平板划线操作后在F区域出现大量的单菌落以供挑选纯种用（或便于菌种分散），所以F区面积最大．每次划线后为避免接种环上的菌种的残留影响下次划线，需要将接种环进行灼烧灭菌杀死上次划线残留的菌种．据图丁分析，F区划线不要与C区相连．
（3）土壤是土壤的微生物的培养基，含有大量的不同的微生物，从土壤中分离枯草芽孢杆菌，宜选择图丁所示的方法划线培养．分离得到的纯化单菌落是一个细胞增殖下次的肉眼可见的有一定的形态和结构的菌群，它属于种群．
（4）碱性蛋白酶的本质是蛋白质，其合成与核糖体有关．碱性蛋白酶的分子较小，可以使用化学结合或物理吸附法的固定化酶的方法提高该酶的利用率．
故答案为：
（1）pH为10.2左右和43℃左右的温度
（2）使该区出现大量的单菌落以供挑选纯种用（或便于菌种分散）　灼烧　C（C、D）
（3）丁　种群
（4）核糖体　化学结合或物理吸附法

点评 本题主要考查微生物的平板划线法操及固定化酶的相关知识，意在强化学生对微生物的筛选与分离、固定化细胞及固定化酶技术的相关知识的识记、理解与运用．