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降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图：

获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点－G↓AATTC－）和BamHⅠ（识别序列和切割位点－G↓GATCC－）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中。下列有关分析不正确的是

[　　]

A．Klenow酶是一种DNA聚合酶

B．合成的双链DNA有72个碱基对

C．EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是保证目的基因和运载体的定向连接

D．筛选重组质粒需要大肠杆菌质粒中含有标记基因

答案：B
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降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，将人工合成的降钙素DNA与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功的在大肠杆菌中得以表达。操作大体过程如下图1、图2，据图回答下列问题：   

（1）图1示人工合成降钙素DNA的过程。从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA。从功能看，Klenow酶是一种___________酶，合成的双链DNA有________个碱基对。
（2）图2将重组质粒导入大肠杆菌最常用的方法是用       处理，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。
（3）如果要通过基因工程获得转基因动物，将目的基因导入受体细胞最常用的方法是             。
（4）以下关于蛋白质工程的说法正确的是（  ）
A．蛋白质工程以基因工程为基础          
B．蛋白质工程就是酶工程的延伸
C．蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进行改造  
D．蛋白质工程只能生产天然的蛋白质

（选修3—现代生物科技专题）（15分，（2）②3分，其余每空2分）。
降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条各72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图。

在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：
（1）Klenow酶是一种＿＿＿＿＿酶，合成的双链DNA有＿＿＿＿＿个碱基对。
（2）获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点-G↓AATTC-）和BamHⅠ（识别序列和切割位点-G↓GATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
②设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿（3分）。
③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有＿＿＿＿＿。
（3）经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（4）上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（1）降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图所示。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：

①上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是               。
②Klenow酶是一种           酶，合成的双链DNA有           个碱基对。
③获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点-G↓AATTC-）和BamHⅠ（识别序列和切割位点-G↓GATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
A:设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是                                             。
B:要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有           。
④经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是                                            。
(2)科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如下图所示)，请结合图示回答下列问题。

①在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分离，形成单个细胞，这个过程中需要利用________酶处理。
②形成重组细胞时应选用________期的卵母细胞，并去掉其细胞核的原因是____________
__________________________________。
③如果重组细胞为贴附性细胞，则在进行原代培养时，会表现出_______和________等特点。
④在胚胎移植技术的基本程序中，冲卵以后，要对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应该发育到         或者囊胚阶段。
⑤上图中所示的生物技术包括有核移植、________、________等。转基因奶牛的克隆成功，说明了动物________具有全能性。

（9分）降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，将人工合成降钙素的DNA与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。据图回答：

（1）图1示人工合成降钙素DNA的过程。从预期新型降钙素的       出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA。从功能看，Klenow酶是一种___________酶，合成的双链DNA有________个碱基对。

（2）图2示利用基因工程获得产品的过程。获取目的基因的方法除图2显示的方法外还有                  。

（3）对图2中a点的操作时，需要的酶有                 和                  。

（4）目的基因插人质粒后 ，不能影响质粒的            

（5）将基因表达载体导入细菌B之前，要将细菌B放入一定浓度的CaCl2溶液中处理，使之成为         的细菌。

（6）上述制备新型降钙素，运用的现代生物工程技术是                  。

 

降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图：在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象，获得的双链DNA经EcoRⅠ(识别序列和切割位点－G↓AATTC－)和BamHⅠ(识别序列和切割位点－G↓GATCC－)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中。下列有关分析不正确的是

A．Klenow酶是一种DNA聚合酶

B．合成的双链DNA有72个碱基对

C．EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是保证目的基因和运载体的定向连接

D．筛选重组质粒需要大肠杆菌质粒中含有标记基因

 

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