Question

人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染．土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源．现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：
（1）分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有

 

、

 

和

 

．
（2）将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养．在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在

 

旁进行操作．接种后的培养皿

 

于37℃的

 

中培养．
（3）用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于

 

培养基．若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的

 

使pH升高，酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源．变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力

 

．
（4）与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数

 

．
A．多     B．少    C．相等     D．几乎为零．

Answer 1

考点：微生物的分离和培养,以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量

专题：

分析：实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌（如接种环）、干热灭菌（如培养皿）、高压蒸汽灭菌（如培养基）等．无菌操作要求在整个实验过程中操作都在酒精灯火焰附近进行，以避免周围微生物的污染．微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法．稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养．

解答： 解：（1）用于微生物培养的器皿、接种工具和培养基等都必须是无菌的，常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌和干热灭菌．
（2）采用稀释涂布平板法将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养；为避免杂菌污染，操作要在酒精灯火焰旁操作，为防止水蒸气在皿盖上凝结会产生水滴，培养皿需要倒置在恒温培养箱中培养．
（3）酚红指示剂可用于鉴别微生物，所以含有酚红指示剂的培养基属于鉴别培养基；尿素被分解成氨可使PH呈碱性，变色区域越大，说明其分解能力越强．
（4）以尿素为氮源的培养基中菌落数少，因为其他微生物不能在该环境中生存．
故答案为：
（1）高压蒸汽灭菌  灼烧灭菌  干热灭菌 
（2）酒精灯火焰    倒置   恒温培养箱
（3）鉴别  氨     越强
（4）B

点评：本题以脲酶为素材，考查微生物的分离和培养、以氮素为氮源测定能生长的细菌的数量，要求考生识记无菌技术，特别是实验室常用的消毒和灭菌方法；掌握培养基的种类，能应用相应的培养基对土壤中的含有脲酶的细菌进行分离．