题目内容
【题目】大肠杆菌含有 2000 种以上的蛋白质，是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一类细菌，大肠杆菌的数量是检测自来水是否受粪便污染的最直接的指标。回答下列问题：
(1)在微生物培养过程中，常用的灭菌方法有______。
(2)通过滤膜法（自来水过滤后的滤膜置于伊红-美蓝培养基中，再进行计数）可以测定自来水中大肠杆菌的数目，伊红-美蓝培养基的主要成分包括：蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红和美蓝水溶液，蛋白胨的作用有___________。（写两点），这种测定方法的主要原理是______，在实验接种前通常需要检测固体培养基______ （填是否）灭菌合格。
(3)大肠杆菌在_______中合成蛋白质，利用______分离提取到的部分大肠杆菌蛋白质。
【答案】灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌 提供碳源、氮源、维生素 大肠杆菌的代谢产物能与伊红-美蓝反应，使菌落呈黑色。根据培养基上菌落的数目，计算出大肠杆菌的数量 是 核糖体 凝胶色谱法
【解析】
1、培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等根据用途分选择培养基、鉴别培养基；大肠杆菌的代谢产物能与伊红—美蓝发生特定的颜色反应，使菌落呈黑色，该培养基是伊红—美蓝培养基，因此属于鉴别培养基。蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成，富含有机氮化合物，也含有一些维生素和糖类，因此添加在培养基中主要作为氮源、也可以提供碳源和维生素。
2、统计菌落数目的方法：（1）显微镜直接计数法：①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌。
（2）间接计数法（活菌计数法）：①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
3、凝胶色谱法的原理是：小分子蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长、移动速度较慢，后被洗脱出来；而分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，路程较短，移动速度较快，先被洗脱出来。所用的洗脱液是磷酸缓冲液。
（1）在微生物培养过程中，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。
（2）蛋白胨含多种有机物，能提供碳源、氮源、维生素等；通过伊红-美蓝染色法可计算培养基上菌落的数目，计算出大肠杆菌的数量；固体培养基配制完成后，需在接种前将空白培养基即未接种的培养基放在适宜的条件下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落出现，检测是否灭菌合格。
（3）大肠杆菌属于原核生物，细胞器只有核糖体，因此在核糖体上合成蛋白质，根据以上分析可知，可以利用凝胶色谱法分离提取到的部分大肠杆菌蛋白质。
新思维寒假作业系列答案【题目】日常生活中，黄曲霉素和苯是两种常见的有害物质。为了探究黄曲霉素、苯对细胞癌变的影响，某生物实验小组以小鼠作为实验对象设计并实施了如下实验：
(1)材料：取____的小鼠若干，均分为A、B、C、D四组，生理盐水配制的0.0lmol/L黄曲霉素溶液，生理盐水配制的0.0lmol/L苯溶液，生理盐水，注射器等。
实验过程：
组别 | 注射物 | 癌变率 |
A | 黄曲霉素溶液lml | ++ |
B | 苯溶液1ml | ++ |
C | 黄曲霉素溶液0.5ml+苯溶液0.5ml | +++++++ |
D | 0 |
（说明：癌变率=癌变小鼠数／每组小鼠总数×l00%，“十”的数量表示癌变率的高低）
(2)上表中D组小鼠的注射物是____，黄曲霉素和苯属于____致癌因子，在这些致癌因子的作用下，细胞中____基因发生突变从而导致细胞癌变。
(3)上述实验结果可以得出的结论是____。
(4)为探究紫杉醇是否有治疗癌症的作用，请用上述A组实验结果中已经发生癌变且癌变程度相同的小鼠为材料，以肿瘤体积的改变量为检测指标，写出实验思路：____________________________________