在培育转基因植物的研究中.卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因.只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长．如图为获得抗虫棉的技术流程．请据图回答:(1)A过程需要的酶有 . ．(2)将重组质粒导入土壤农杆菌前.需要用处理土壤农杆菌．(3)B过程的培养基除含有必要营养物质.琼脂和激素外.还必须加入 ,C过� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长．如图为获得抗虫棉的技术流程．

请据图回答：
（1）A过程需要的酶有

、

．
（2）将重组质粒导入土壤农杆菌前，需要用

处理土壤农杆菌．
（3）B过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入

；C过程的名称是

．
（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，发现植株中具有抗虫基因，是否可以说转基因抗虫植株培育获得成功？

，请说明理由．

．
（5）整个过程应用的主要生物技术是

．

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：根据题意和图示分析可知：首先采用基因工程技术将抗虫基因导入离体棉花叶片组织，其过程为：获取目的基因（抗虫基因）→构建基因表达载体→将目的基因导入农杆菌→用含有卡那霉素的选择培养基筛选含有重组质粒的土壤农杆菌→利用农杆菌转化法将目的基因导入离体棉花叶片组织细胞．
其次采用植物组织培养技术，将导入抗虫基因的细胞培养成转基因抗虫植株，其过程主要包括脱分化和再分化两个步骤．
图中A表示基因表达载体的构建过程，B表示用选择培养基筛选含有重组质粒的土壤农杆菌的过程，C表示脱分化过程，D表示个体水平上的检测．

解答： 解：（1）基因表达载体的构建过程：首先用同一种限制酶切割目的基因和质粒，然后再用DNA连接酶把目的基因和运载体质粒连接成重组质粒．
（2）将目的基因导入微生物细胞常采用感受态细胞法，即用Ca²⁺处理微生物细胞，使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态．
（3）C过程为诱导选择，既要诱导出愈伤组织还要进行筛选，筛选出被含重组质粒的农杆菌侵染的叶片细胞，淘汰掉普通细胞，故应添加卡那霉素．C过程的名称是脱分化，形成愈伤组织．
（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，发现植株中具有抗虫基因，这说明抗虫基因已经成功导入受体细胞，但不能看出抗虫基因是否表达，因此不能说转基因抗虫植株培育获得成功．
（5）整个过程应用的主要生物技术是基因工程、植物组织培养．
故答案为：
（1）限制性内切酶        DNA连接酶
（2）CaCl₂
（3）卡那霉素    脱分化
（4）不可以   要看抗虫基因在植株中是否表达
（5）基因工程、植物组织培养

点评：本题结合转基因抗虫植株的培育过程图，考查基因工程和植物组织培养的相关知识，要求考生识记基因工程的工具及操作步骤，能准确判断图中各过程的名称，能结合图中信息准确答题．