题目内容
下图为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线(图中B、E两点表示经筛选后继续培养),请据图回答下列问题:![]()
(1)OA段的培养称为________培养,AB段可能发生了_______现象,需要用________酶处理使组织细胞分散开来。
(2)动物细胞培养和植物组织培养过程中,就细胞增殖、分化来说,动植物细胞都要进行________,不同的是植物细胞还要进行___________________。
(3)制备单克隆抗体时,可选取图中________点的细胞与相应的淋巴细胞融合形成杂交细胞,该点细胞的细胞膜成分发生的变化是 。
(4)核移植时一般不选CD段细胞核的理由是 。
(1)原代 接触抑制 胰蛋白 (2)增殖(或分裂) 脱分化和再分化
(3)E 糖蛋白减少(4)传代培养10代以上,细胞核型(染色体)可能会发生改变
解析试题分析:
(1)OA段是初次培养,称为原代培养;AB段增殖速度缓慢,可能发生了接触抑制现象,需要用胰蛋白酶处理使组织细胞分散开来。
(2)动植物细胞培养过程只需进行增殖;而植物组织培养过程除了进行增殖外,还有进行细胞分化。
(3)制备单克隆抗体时,需要将B淋巴细胞和能无限增殖的细胞融合,图中E点的细胞发生癌变具有无限增殖的能力,可与相应的淋巴细胞融合形成杂交细胞。癌细胞的细胞膜成分发生改变,细胞膜上的糖蛋白减少,细胞间的黏着性下降。
(4)传代培养10代以上,细胞核型(染色体)可能会发生改变,所以核移植时一般不选CD段细胞核,而选用10代以内的细胞。
考点:本题考查动物细胞培养的相关知识。
点评:本题结合曲线图,考查动物细胞培养的相关知识,意在考查考生的识记能力和分析曲线图的能力,属于中等难度题。
(6分)下图是动物细胞工程过程中相关的技术操作过程,请据图回答下列问题:![]()
(1) 在操作一中,为了使细胞彼此分离,通常是先用剪刀剪碎组织,再用消化法将细胞分开,消化法用的消化酶是胰蛋白质酶,或胶原酶。研究表明胶原蛋白酶和胰蛋白酶在消化时的机制有差异,下表为两种酶活性的比较表。
| 项目 | 胰蛋白酶 | 胶原酶 |
| 消化特性 | 适用于消化软组织 | 适用于消化纤维多的组织 |
| 用量 | 0.01%~0.5% | 0.1~0.3 mg/ml |
| 消化时间 | 0.5~2小时 | 1~12小时 |
| pH | 8~9 | 6.5~7.0 |
| 作用强度 | 强烈 | 缓和 |
| 细胞影响 | 时间过长时有影响 | 时间长时无大影响 |
| 动物血清 | 有抑制作用 | 无抑制作用 |
| Ca2+和Mg2+ | 有抑制作用 | 无抑制作用 |
(2) 动物细胞培养液配制好后,通常还要先抽取少许放入培养瓶中,置于37℃、CO2培养箱中24小时后观察,这样做的目的是__________________________。
(3) 在动物细胞培养过程中通常要对细胞进行计数,计数的细胞数应为活细胞数。某同学在细胞培养的一次测定中,首先振荡摇匀培养液并立即吸细胞悬液少数向一试管中滴入细胞悬液9滴,再滴入台盼蓝(活细胞染液)1滴,混匀。再从试管中取混合液向计数板边缘轻轻滴1~2滴已染色的细胞悬液,使之充满计数板和盖玻片之间间隙,经测定计数室每小格中活细胞数平均为3个,则原每毫升培养液中含有的活细胞数应为________个。
(4) 科研人员研究发现某一种抗原刺激机体后,在鼠体内可发现有多种效应B细胞都可产生针对于该特定抗原的抗体,这些抗体混合在一起即为多克隆抗体。试从抗原结构的角度分析产生该现象的原因是____________________________________。
研究发现随着动物衰老,血液中谷胱甘肽过氧化物酶活性和皮肤胶原蛋白中肤羟脯氨酸含量会下降,而血液中脂质过氧化物(LPO)含量会增加。为研究大豆异黄酮对刚进入衰老期的小鼠相关指标的影响做了以下实验。
组别 | 处理 | 30天后从尾静脉取血测定 | 45天后取背部皮肤测定 | |
将适量同龄、健康成年小鼠分组培养 | LPO含量 (μg/ml) | 谷胱甘肽过氧化酶活性(U) | 肤羟脯氨酸含量(μg/ml) | |
对照组 | 清水+饲料 | 34.1 | 23.7 | 26.2 |
高剂量 | 含不同剂量大豆异黄酮的溶液+饲料 | 23.5 | 18.9 | 35.7 |
中剂量 | 30.4 | 25.6 | 37.8 | |
低剂量 | 31.3 | 24.1 | 30.4 |
请回答:
(1)可用???????????? 试剂将胶原蛋白溶液与肤羟脯氨酸溶液区分开;皮肤组织细胞分散后更有利于提取肤羟脯氨酸,为此最好加入????????? 酶。
(2)本实验用小鼠而不用家兔作为材料的优点主要是???????????? ;为保证实验数据的准确性,饲料中不能含有的物质是?????????????? 。
(3)请在下图中用柱形图描述实验中衰老小鼠血液中LPO的含量。
![]()
(4)胶原蛋白中肤羟脯氨酸含量下降会引起皮肤衰老,实验表明, ? ? 剂量的大豆异黄酮对延缓皮肤衰老的作用最强;大豆异黄酮对衰老小鼠血液谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响是??? ?? ???? ;高剂量的大豆异黄酮通过显著降低????????? 而对动物衰老有一定的延缓作用。
(6分)下图是动物细胞工程过程中相关的技术操作过程,请据图回答下列问题:
![]()
(1) 在操作一中,为了使细胞彼此分离,通常是先用剪刀剪碎组织,再用消化法将细胞分开,消化法用的消化酶是胰蛋白质酶,或胶原酶。研究表明胶原蛋白酶和胰蛋白酶在消化时的机制有差异,下表为两种酶活性的比较表。
|
项目 |
胰蛋白酶 |
胶原酶 |
|
消化特性 |
适用于消化软组织 |
适用于消化纤维多的组织 |
|
用量 |
0.01%~0.5% |
0.1~0.3 mg/ml |
|
消化时间 |
0.5~2小时 |
1~12小时 |
|
pH |
8~9 |
6.5~7.0 |
|
作用强度 |
强烈 |
缓和 |
|
细胞影响 |
时间过长时有影响 |
时间长时无大影响 |
|
动物血清 |
有抑制作用 |
无抑制作用 |
|
Ca2+和Mg2+ |
有抑制作用 |
无抑制作用 |
据表中信息可知胰蛋白质酶作用时间需限制在0.5~2小时,原因是____________________________________,为了控制胰蛋白酶的消化作用时间,常用消化临界时向溶液中直接加入________即可使酶灭活而终止消化。操作一的原理是__________________。
(2) 动物细胞培养液配制好后,通常还要先抽取少许放入培养瓶中,置于37℃、CO2培养箱中24小时后观察,这样做的目的是__________________________。
(3) 在动物细胞培养过程中通常要对细胞进行计数,计数的细胞数应为活细胞数。某同学在细胞培养的一次测定中,首先振荡摇匀培养液并立即吸细胞悬液少数向一试管中滴入细胞悬液9滴,再滴入台盼蓝(活细胞染液)1滴,混匀。再从试管中取混合液向计数板边缘轻轻滴1~2滴已染色的细胞悬液,使之充满计数板和盖玻片之间间隙,经测定计数室每小格中活细胞数平均为3个,则原每毫升培养液中含有的活细胞数应为________个。
(4) 科研人员研究发现某一种抗原刺激机体后,在鼠体内可发现有多种效应B细胞都可产生针对于该特定抗原的抗体,这些抗体混合在一起即为多克隆抗体。试从抗原结构的角度分析产生该现象的原因是____________________________________。