Question

10．如图表示转基因烟草的培育过程．请据图回答：
（1）图示过程将外源基因导入受体细胞的方法是农杆菌转化法，若将外源基因导入动物细胞，目前采用最多、最有效的是显微注射技术．
（2）为便于鉴别受体细胞中是否含有外源基因，携带外源基因的质粒上应有标记基因，还应有启动子 终止子，以利于外源基因的表达．
（3）该过程中用到的植物细胞工程技术是植物组织培养，这项技术应在无菌条件下进行，依据的生物学原理是植物细胞具有全能性．
（4）外源基因的检测首先要采用DNA分子杂交技术检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因，其次采用分子杂交技术检测目的基因是否转录出了mRNA，最后通过抗原-抗体杂交检测目的基因是否翻译成蛋白质．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）图示过程将外源基因导入受体细胞的方法是农杆菌转化法；将外源基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法．
（2）基因表达载体的组成包括标记基因、启动子、终止子和目的基因，其中标记基因有利于鉴别受体细胞中是否含有外源基因，启动子和终止子与目的基因的表达有关．
（3）该过程中用到的植物细胞工程技术是植物组织培养，其依据的生物学原理是植物细胞具有全能性．植物组织培养技术需在无菌条件下进行．
（4）外源基因的检测首先要采用DNA分子杂交技术检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，其次采用分子杂交技术检测目的基因是否转录出了mRNA，最后通过抗原-抗体杂交检测目的基因是否翻译成蛋白质．
故答案为：
（1）农杆菌转化法      显微注射
（2）标记基因     启动子、终止子
（3）植物组织培养    无菌      植物细胞具有全能性
（4）转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因      目的基因是否转录出了mRNA            目的基因是否翻译成蛋白质

点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．