Question

10．微生物与人类关系密切．虽然有些微生物能使动植物患病，但多数微生物对人类是有益的．请回答下列问题：
（1）培养微生物的培养基配方中一般含有水、碳源、氮源和无机盐．从土壤中分离分解尿素的细菌时，培养基中加的唯一氮源为尿素，这种培养基称为选择培养基．
（2）在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，为什么要将平板倒置？皿盖上会凝有水珠，防止水珠落入培养皿造成污染，还可使培养基表面的水分更好地挥发．
（3）微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法．在用平板划线法接种时，为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环第一步灼烧接种环是防止接种环上有其他微生物而污染培养基．每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次接种时留下的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来自上次划线的末端，以便通过多次划线后，得到单个的菌落．
在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？划线结束后仍要灼烧接种环以免菌种对环境造成污染．

Answer 1

分析 1、选择培养基：根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率．
2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．3、划线分离操作中的有关问题：
（1）在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环，在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环．

	第一次灼烧	每次划线之前灼烧	划线结束灼烧
目的	避免接种环上可能存在的微生物污染培养基	杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种	杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染或感染操作者

②在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，以免接种环温度太高，杀死菌种．
③在进行第二次以及其后的划线操作时'要从上一次划线的末端开始划线．每次划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落．
（2）进行恒温培养时，要将培养皿倒置的原因如果正放培养皿，则皿盖上形成的水滴会落入培 养基表面并且扩散开．如果培养皿中已形成菌落，则茵落中的细菌会随水扩散，菌落间相互影响，很难再分成单菌落，达不到分离的目的．因此恒温培养时，培养皿必须倒置．
（3）培养后判断是否有杂菌污染的方法
①从菌落的形态看，是否湿润、透明、黏稠，呈何种颜色等等，是区别细菌、酵母菌、放线菌和霉菌的关键指标．
②用显微镜镜检观察其形态、大小，看是否有菌丝、孢子、芽孢等，这也是区别细菌、酵母菌、放线菌和霉菌的关键指标．

解答 解：（1）从土壤中分离出分解尿素的细菌，需用以尿素为唯一氮源的选择性培养基．
（2）在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，要将平板倒置，因为皿盖上会凝有水珠，防止水珠落入培养皿造成污染，还可使培养基表面的水分更好地挥发．
（3）接种过程中，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法两种方法．每次划线前都要灼烧接种环的目的是杀死上次接种时留下的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来自上次划线的末端，以便通过多次划线后，得到单个的菌落．操作的第一步和最后一步需灼烧接种环的目的分别是防止接种环上有其他微生物而污染培养基、以免菌种对环境造成污染．
故答案为：
（1）尿素　选择　
（2）皿盖上会凝有水珠，防止水珠落入培养皿造成污染，还可使培养基表面的水分更好地挥发　
（3）稀释涂布平板　第一步灼烧接种环是防止接种环上有其他微生物而污染培养基．每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次接种时留下的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来自上次划线的末端，以便通过多次划线后，得到单个的菌落　划线结束后仍要灼烧接种环以免菌种对环境造成污染

点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的成分、种类及功能；掌握接种微生物常用的两种方法，尤其是划线分离操作中需要注意的有关问题，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．