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【题目】【选修1——生物技术实践】

急性肠胃炎是由细菌通过消化道进入人体导致的。因此检验饮用水中细菌的含量是有效监控疾病发生的必要措施。请回答下列与检验饮用水有关的问题:

(1)为检验大肠杆菌的含量时,该小组将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1ml稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为44、43和42,据此可得出每升水样中的活菌数为________。但通常计算出来的活菌数目往往比实际的数目低,原因是_____________________。

(2)用该方法统计样本菌落数时是否需要对照组?______。为什么?_____________。

(3)有三种材料或用具需要消毒或灭菌:①培养细菌用的培养基与培养皿;②玻璃棒、试管和烧瓶;③实验操作者的双手。其中需要消毒的是________________,需要灭菌的是________________。

(4)下图所示的四种菌落分布中,不可能由稀释涂布平板法得到的是____________。

(5)已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸、产气,现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具有塞子的试管,应如何判断水样中是否有大肠杆菌?____________________________________。

【答案】4.3×107当两个或多个细菌连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落需要因为需要判断培养基是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格)③①②D通过无菌操作向试管内注入一定量待测水样,再注入适量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液,塞上塞子,混匀后置于37℃恒温箱培养24 h。若试管内有气泡生成,则说明水样中有大肠杆菌,否则,说明水样中无大肠杆菌

【解析】分析:微生物的营养物质主要包括碳源、氮源、水和无机盐等.微生物的培养的关键是无菌操作,接种后的培养皿应该倒置培养。分类或筛选微生物常用的接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法。可以根据菌落的特征进行初步的鉴定或分类。

(1)由由题意知1ml水样中的菌落数是(44+43+42)÷3÷0.1×100=4.3×104个,每升水样中的活菌数为3.8×104×103=4.3×107.当两个或多个细菌连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落导致通常计算出来的活菌数目往往比实际的数目低;

(2)因为需要判断培养基是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格),所以用该方法统计样本菌落数时是否需要对照组;

(3)在使用操作过程中,实验操作者的双手应当进行消毒,培养细菌用的培养基与培养皿应当进行灭菌,玻棒、试管、烧瓶和吸管等玻璃器皿应当进行干热灭菌;

(4)题干所述方法为稀释涂布平板法.据图分析,A、B、C三个培养皿的菌落分别均匀,应该属于稀释涂布平板法得到的,D属于平板划线法接种得到的,不可能是稀释涂布平板法得到的,故选D;

(5)通过无菌操作向试管内注入一定量待测水样,再注入适量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液,塞上塞子,混匀后置于37℃恒温箱培养24 h。若试管内有气泡生成,则说明水样中有大肠杆菌,否则,说明水样中无大肠杆菌。

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