Question

人的内皮抑素（一种蛋白质）能诱导血管内皮细胞凋亡，进而抑制新血管的产生。临床上通过静脉注射含有内皮抑素基因的腺病毒感染肿瘤细胞，使肿瘤细胞产生并释放内皮抑素，抑制新生血管的形成，使肿瘤细胞进人休眠状态并诱导其凋亡。

回答下列问题：

（1）从肝细胞中提取总mRNA,利用逆转录酶合成 ，根据内皮抑素基因的 设计并合成引物，利用PCR技术得到大量内皮抑素基因。

（2）在构建含内皮抑素基因的腺病毒并导人受体细胞的过程中，以 作为工具酶，以 作为载体。

（3）在进入临床使用前，需用体外培养的血管内皮细胞进行生理、病理检测。为获得大量的血管内皮细胞，首先用 酶处理血管内皮组织，使其分散成单个细胞，制成细胞悬液，然后将其放人含 等一些天然成分的合成培养基中培养。

（4）血管内皮细胞被重组腺病毒感染后，若通过 方法检测呈阳性并观察到细胞凋亡，则说明内皮抑素基因得到表达且具有生物学活性。

（5）临床上将含内皮抑素基因的腺病毒通过静脉注射感染肿瘤细胞，使肿瘤生长受到抑制，这种治疗方法属于 （填“体内”或“体外”）基因治疗。

Answer 1