Question

8．回答有关微生物的培养与应用问题：
（1）某微生物实验中使用的发酵培养液成分如表，该培养液含有微生物营养物质有水、无机盐和碳源、氮源和生长因子．

培养液 成分	葡萄糖	蛋白胨	牛肉膏	酵母汁	NaCl	K2HPO4	半胱氨酸	微量元素
含量（g/L）	20	4	2	1	2	1.5	0.5	适量

（2）培养基配制时，培养基灭菌采用的最适方法是高压蒸汽灭菌，灭菌与调pH的先后顺序是先调PH值再灭菌．
（3）如图接种微生物的方法是平板划线法，目的是分离（纯化）单个细胞形成的菌落．
（4）在配制从土壤中筛选纤维素分解菌的培养基时，需加入纤维素作为唯一的碳源，该培养基属于选择培养基．经梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是刚果红，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌．
（5）一同学在稀释倍数为10⁴的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，则每毫升样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL）1.17×10⁶．

Answer 1

分析 1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用．
2、平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．

解答 解：（1）微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，表格中的葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏为微生物的生长提供的碳源和氮源．
（2）培养基配制时，培养基灭菌一般采用高压蒸汽灭菌，培养基配置过程中需要先调PH值再灭菌．
（3）如图接种微生物的方法为平板划线法，目的是分离（纯化）单个细胞形成的菌落．
（4）在配制从土壤中筛选纤维素分解菌的培养基时，需加入纤维素作为唯一的碳源，该培养基属于 选择培养基．经梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入刚果红，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌．
（5）根据题意可知，每毫升样品中的活菌数是23.4÷0.2×10⁴=1.17×10⁶．
故答案为：
（1）碳源、氮源   
（2）高压蒸汽灭菌    先调PH值再灭菌
（3）平板划线法      
（4）纤维素   选择       刚果红   透明圈　
（5）1.17×10⁶

点评 本题考查了微生物的分离与培养以及培养基对微生物的选择作用，要求考生能够掌握微生物培养过程中的无菌技术的主要内容，识记微生物分离与纯化常用接种方法，根据培养的要求确定选择培养基的成分等．