Question

8．白细胞介素是一类淋巴因子．研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母菌细胞中，使其分泌出有活性的白细胞介素．

（1）为增加白细胞介素基因的数量，可使用PCR技术，但前提是必须知道该基因的部分核苷酸序列，以便根据这一序列合成设计引物．
（2）为便于鉴别受体细胞中是否含有外源基因，携带外源基因的质粒上应有标记基因，还应有启动子和终止子，以利于外源基因的表达．
（3）在重组载体导入酵母菌细胞之前，需用Ca²⁺处理酵母菌细胞，白细胞介素基因进入酵母菌细胞内，并且在其细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化．在表达过程中，启动子需与RNA聚合酶识别和结合，从而驱动转录过程．
（4）为了能成功表达出白细胞介素，不使用细菌，而使用酵母菌细胞作为受体细胞，可能原因是细菌细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器．

Answer 1

分析 分析题图：图示表示基因表达载体的构建过程，载体和目的基因都有限制酶EcoRⅠ与EcoR52的切割位点，所以切割载体和目的基因时用限制酶EcoRⅠ与EcoR52，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组载体．基因表达载体含有目的基因、启动子、终止子、标记基因等成分．

解答 解：：（1）基因工程中，扩增目的基因的方法为PCR技术，但前提是必须知道基因的已知序列，以便设计引物．
（2）基因表达载体含有目的基因、启动子、终止子、标记基因等成分，标记基因的作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因．启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质．终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端．因此启动子和终止子可利于外源基因的表达．
（3）在重组载体导入酵母菌细胞之前，需用Ca²⁺处理酵母菌，使酵母菌称为感受态细胞，白细胞介素基因进入酵母菌细胞内，并且在其细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化．在表达过程中，启动子需与RNA聚合酶识别和结合，从而驱动转录过程．
（4）在体液免疫过程中，白细胞介素是由T淋巴细胞分泌的．由于细菌属于原核生物，细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器，因此为了能成功表达出白细胞介素，不使用细菌，而使用酵母细胞作为受体细胞．
故答案为：
（1）PCR     设计引物
（2）标记基因      启动子和终止子
（3）Ca2+转化      RNA聚合酶
（4）细菌细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器

点评 本题结合图解，综合考查免疫、基因工程、PCR技术等知识，要求考生识记人体免疫细胞的组成及特异性免疫过程；识记基因工程的工具及操作步骤，能运用所学的知识答题．