Question

16．欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是（　　）

• A． 用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌
• B． 将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释
• C． 同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板
• D． 可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照

Answer 1

分析 1、培养基按功能分：

种类	制备方法	特征	用途
选择培养基	培养基中加入某种化学成分	根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率	加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
鉴别培养基	加入某种试剂或化学药品	依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计	鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌

2、统计菌落数目的方法
（1）显微镜直接计数法
 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌．
（2）间接计数法（活菌计数法）
 ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌．
②操作
a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性．
b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数．
③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数．

解答 解：A、以尿素为唯一氮源的选择培养基可筛选出分解尿素的细菌，A错误；
B、为防止土壤浸出液浓度过高，难以获得单菌落，要将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释，B正确；
C、同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板，防止偶然因素对实验结果的影响，C正确；
D、可以将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照，以判断培养基灭菌是否彻底，D正确．
故选：A．

点评 本题的知识点是分离分解尿素的细菌的操作方法及所用的培养基，主要考查学生对分解尿素的菌的分离和计数这一课题的掌握与运用．