题目内容
（10分）多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。番茄果实成熟中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程的方法减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入到番茄细胞中，得到转基因番茄。请根据下图回答：
（1）提取目的基因
①若已获取PG的mRNA，可通过 获取PG基因。
②在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录，结构A上应具有 结合位点。得到的目的基因两侧需人工合成BamHI黏性末端。已知BamHI的识别序列如图甲所示，请在下图乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端。
③重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是 。
（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有 的培养基进行筛选，与此同时，为能更好地达到培养目的，还需在培养基中加入 。培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞 现象来鉴别细胞壁是否再生。
（3）由于导入的目的基因能转录反义RNA，且能与 互补结合，抑制PG基因的正常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄 ，则可确定转基因番茄成功。
（4）获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用 方法使子代保持转基因的优良性状。
（10分）（1）①逆转录（或cDNA文库）
②RNA聚合酶
③大量复制目的基因（克隆目的基因）
（2）卡那霉素 植物激素（生长素和细胞分裂素） 是否发生质壁分离
（3）天然PG基因转录的mRNA 长
（4）植物组织培养
【解析】
试题分析：⑴①已获取PG的mRNA，可通过逆转录或cDNA文库的方法获得目的基因。②因转录的产物是mRNA，在转录时需要RNA聚合酶。目的基因两侧的黏性末端见答案。③重组质粒进入大肠杆菌的目的是让目的基因大量复制。
⑵因质粒上有卡那霉素基因，故含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后将会使原生质体获得抗卡那霉素的能力，所以可用含卡那霉素的培养基进行筛选；因需将原生质体培养成植株，所以要进行植物组织培养，在此过程中需加入植物激素；植物细胞在质量分数为25%的蔗糖溶液中会发生质壁分离现象，所以可以用来鉴别细胞壁是否再生。
⑶反义RNA一般是指与编码链或有义链互补的DNA链编码的RNA，mRNA是由编码链或有义链编码的RNA，所以反义RNA和mRNA分子能互补成双链的RNA。由于核糖体不能翻译双链的RNA，所以反义RNA与mRNA特异性的互补结合, 即抑制了该mRNA的翻译；若转基因番茄的保质期比非转基因番茄长，则可确定转基因番茄成功。
⑷获得的转基因番茄产生的种子（是有性生殖的后代，会发生性状分离）不一定保留目的基因，故要保持该优良性状，可采用无性生殖即植物组织培养的方法。
考点：本题考查基因工程、植物组织培养等知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。
一线名师提优试卷系列答案（08黄冈中学二模）（20分）回答I、Ⅱ两小题。
I．（8分）现代生物技术在动植物育种工作中均发挥了巨大的作用。请回答有关问题：
（1）番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要，科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。操作流程如下图，请回答：
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①重组DNA的建构需要的工具酶有 。
②在构建基因表达载体时，除了要在重组DNA中插入目的基因外，还需要有启动子、终止子以及_ 。
③从图中可见，mRNA1和mRNA2的结合直接导致了 无法合成，最终使番茄获得了抗软化的性状。
④普通番茄细胞导入目的基因后，先要接种到诱导培养基上培养，脱分化后得到 ，再转接到分化培养基上，诱导出试管苗，然后进一步培养成正常植株。
Ⅱ．( 12分)果蝇繁殖力强、易饲养，是一种良好的遗传学研究材料。实验室一个小组发现了1只灰体残翅(未交配过的雌果蝇)，另一小组发现了1只黑体长翅雄果蝇。两个小组将这2只果蝇进行下述实验来解决有关问题。
实验步骤：
①把灰体残翅雌果蝇和黑体长翅雄果蝇放入同一容器中培养，使其交配并产生足够的后代Fl。
②F1成熟后观察雌雄果蝇的性状，发现全是灰体长翅。
③F1雌雄果蝇相互交配产生F2，观察其性状并记录结果。
④统计分析F2的各种表现型及其比例。
根据上述材料回答有关问题：
（1）能否从F1所表现出的性状推断出长翅与残翅的遗传方式是细胞质遗传还是细胞核遗传?请简要说明理由。（3分）
（2）若已知控制黑体、灰体性状的基因位于细胞核中，能否通过预测F2黑体、灰体的性状表现来推断控制黑体、灰体的基因是位于常染色体上还是X染色体上？请简要说明理由。（3分）
（3）若F2中有黑体、残翅出现，且控制这两对性状的基因位于常染色体上，如何确定控制这两对性状的基因是否位于两对同源染色体上？(要求：通过预测F2的表现型及其比例并作出相应分析和结论) （6分）