在培育转基因植物的研究中.卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因.只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长．下图为获得抗虫棉的技术流程．请据图回答:(1)A过程需要的酶有 . ．(2)B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是 . ．(3)要把重组质粒导入土壤农杆菌.需先用处理土壤农杆菌.使土壤农� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长．下图为获得抗虫棉的技术流程．请据图回答：

（1）A过程需要的酶有

、

．
（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是

，

．
（3）要把重组质粒导入土壤农杆菌，需先用

处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为

态；含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后，将离体棉花叶片组织培养成再生植株要经过[C]

和[E]

．为了筛选出含有目的基因的细胞，C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入

．
（4）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律．
①将转基因植株与卡那霉素敏感型植株杂交，后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型数量比为1：1．
②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为

．

考点：基因工程的应用

专题：

分析：据图分析，A过程是目的基因与运载体结合形成重组质粒的过程，这一过程需要限制性内切酶以及DNA连接酶；基因工程中作为运载体的基本要求包括：①能在宿主细胞中复制并稳定地保存；②具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接；③具有某些标记基因，便于进行筛选；B过程表示选择培养；C过程表示诱导产生愈伤组织，E过程表示再分化．

解答： 解：（1）基因表达载体的构建过程：首先用同一种限制酶切割目的基因和质粒，然后再用DNA连接酶把目的基因和运载体质粒连接成重组质粒．
（2）B过程是培养并选择含有重组质粒的土壤农杆菌，其中“选择”体现了质粒作为运载体必须具备具有标记基因；“培养”体现了质粒作为运载体必须能在宿主细胞中复制并稳定保存．
（3）要把重组质粒导入土壤农杆菌，需先用氯化钙溶液处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为感受态     态；含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后，将离体棉花叶片组织培养成再生植株要经过[C]脱分化和[E]再分化．为了筛选出含有目的基因的细胞．C过程为诱导选择，既要诱导出愈伤组织还要进行筛选，筛选出被含重组质粒的农杆菌侵染的叶片细胞，淘汰掉普通细胞，故应添加卡那霉素．
（4）后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1，说明此杂交方式为测交，抗卡那霉素型为显性杂合体（Aa），卡那霉素敏感型为隐性纯合子（aa），杂交后代表现型抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1．抗卡那霉素型植株是显性杂合体（Aa），该类型植株自交，即Aa×Aa，后代性状分离比是抗卡那霉素型：卡那霉素敏感型=3：1．
故答案为：
（1）限制酶、DNA连接酶
（2）具有标记基因   能在宿主细胞中复制并稳定保存
（1）氯化钙溶液   感受态   脱分化再分化卡那霉素
（3）3：1

点评：本题结合获得抗虫棉的技术流程图，综合考查基因工程、植物组织培养和基因的分离定律，意在考查考生的识记能力、理解应用能力和计算能力，有一定难度．