Question

【题目】【生物——选修3:现代生物科技专题】

噬菌体抗体库技术是指将人的全部抗体基因插入噬菌体的基因组中,然后让该噬菌体感染大肠杆菌，最终使抗体以融合蛋白的形式表达于噬菌体的表面，形成含有全套抗体谱的噬菌体抗体库。请问答下列问题：

（1）人体内的抗体是在________(细胞名称)中合成后，以胞吐的方式分泌到内环境中的。

（2）若要获取人的抗体基因，可以从细胞中提取相应的RNA，通过逆转录过程获 取______片段，再合成目的基因。采用PCR技术扩增目的基因的过程中,需要的物质除模板链、四种脱氧核苷酸外,还需要____________。

（3）构建重组DNA分子的目的是______________。在噬菌体抗体库的构建过程中，是否需要利用CaCl2处理大肠杆菌以制备感受态细胞？请写出原因:_______。

（4）检测大肠杆菌转录出的相应RNA时应采用_______技术，即从原核细胞中提取RNA,以________为探针,与RNA杂交。该技术的原理是___________。

Answer 1

【答案】 浆细胞 cDNA 引物和DNA聚合酶(Taq酶) 使人的抗体基因在大肠杆菌细胞中稳定表达，并能传递给下一代 不需要，噬菌体可以侵染大肠杆菌，将重组DNA分子注入大肠杆菌 分子杂交 用放射性同位素标记的目的基因（放射性同位素标记的抗体基因） 碱基互补配对

【解析】试题分析：本题综合考查学生对基因工程的知识的识记和理解能力。解答本题需熟记并理解基因工程的基本操作程序并形成清晰的知识网络。在此基础上，结合问题情境，从题意中提取有效信息并与噬菌体侵染细菌的实验原理、分泌蛋白的概念与分泌过程建立联系，进行相关问题的解答。

(1)人体内的抗体是在浆细胞中合成后，以胞吐的方式分泌到内环境中。

(2)从人的细胞中提取抗体基因的RNA，通过逆转录过程获取cDNA片段，再合成目的基因。采用PCR技术扩增目的基因的过程中,需要的物质除模板链、四种脱氧核苷酸外,还需要引物和DNA聚合酶(Taq酶)。

(3)构建重组DNA分子（基因表达载体）的目的是：使人的抗体基因在大肠杆菌细胞中稳定表达，并能传递给下一代。由于噬菌体可以侵染大肠杆菌，将重组DNA分子注入到大肠杆菌，因此在噬菌体抗体库的构建过程中，不需要利用CaCl2处理大肠杆菌以制备感受态细胞。

(4) 检测大肠杆菌转录出的相应RNA时应采用分子杂交技术，即从原核细胞中提取RNA,以用放射性同位素标记的目的基因（放射性同位素标记的抗体基因）为探针,与RNA杂交。该技术的原理是碱基互补配对。