题目内容
5．基因疫苗指的是DNA疫苗，是将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的质粒上，然后将质粒直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答．回答下列问题：（1）要获得编码抗原的基因，首先要提取出病原体的DNA或RNA，并将RNA逆转录成DNA，要大量获得表达特异抗原的基因，可采用 PCR 方法．
（2）将抗原基因插入质粒的过程，即构建基因表达载体的过程，通常一个基因表达载体的组成，除了抗原基因（目的基因）和启动子外，还有终止子、标记基因．
（3）一般将重组质粒利用显微注射的方法送入受体的肌肉细胞，进入细胞核并表达抗原蛋白．
（4）与传统疫苗相比，基因疫苗不仅能在宿主体内较长时间存在，还可以诱导产生体液免疫和细胞免疫（填“体液免疫”“细胞免疫”或“体液免疫和细胞免疫”）．
（5）基因疫苗是在基因治疗技术的基础上发展而来的．基因治疗是把正常基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的．
分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
解答 解：（1）RNA在逆转录酶的催化下，逆转录形成相应的DNA．
（2）一个完整的基因表达载体至少包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等．
（3）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法．
（4）基因疫苗指的是DNA疫苗，导入人或动物体后可表达产生相应的抗原蛋白，这些抗原蛋白能刺激机体产生体液免疫和细胞免疫．
（5）基基因治疗是把正常基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的．
故答案为：
（1）逆转录成DNA
（2）终止子、标记基因
（3）显微注射
（4）体液免疫和细胞免疫
（5）正常基因
点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确答题．
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