Question

17．某一实验小组的同学，欲通过制备固定化酵母细胞进行葡萄糖溶液发酵实验，实验材料及用具齐全．
（1）酵母细胞的固定采用的方法包埋法．
（2）该实验小组的同学制备固定化酵母细胞的过程为：
A．使干酵母与蒸馏水混合并搅拌，使酵母菌活化
B．将无水CaCl₂溶解在自来水中配成CaCl₂溶液
C．用酒精灯大火连续加热配制海藻酸钠溶液
D．向刚溶化好的海藻酸钠溶液中加入已活化的酵母细胞，充分搅拌并混合均匀
E．将与酵母混匀的海藻酸钠液注入蒸馏水中，观察凝胶珠形成
请你改正其中错误的操作（写出4点）：
①配制CaCl₂溶液时应用蒸馏水．
②海藻酸钠溶解应用小火或间断加热．
③海藻酸钠溶液冷却至常温再加入酵母细胞．
④注射器中的海藻酸钠和酵母细胞的混合物应滴入CaCl₂溶液．
（3）用固定化酵母细胞进行葡萄糖发酵时：
①加入葡萄糖液的浓度不能过高的原因是：可以防止酵母菌细胞过度失水死亡．
②为了使实验中所用到的固定化酵母细胞可以反复运用，实验过程一定要在无菌条件下进行．

Answer 1

分析 海藻酸钠溶液固定酵母细胞的步骤：
1、酵母细胞的活化 
2、配制0.05mol/L的CaCl₂溶液 
3、配制海藻酸钠溶液 （该实验成败的关键步骤） 
4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 
5、固定化酵母细胞
海藻酸钠溶液固定酵母细胞的注意事项：
1、配制海藻酸钠溶液：小火、间断加热、定容，如果加热太快，海藻酸钠会发生焦糊．
2、海藻酸钠溶液与酶母细胞混合：冷却后再混合，注意混合均匀，不要进入气泡
3、制备固定化酵母细胞：高度适宜，并匀速滴入
4、刚溶化的海藻酸钠应冷却后再与酵母菌混合，否则温度过高会导致酵母菌死亡．

解答 解：（1）酵母细胞的固定常用的方法是包埋法．
（2）①不能将无水CaCl₂溶解在自来水中，配制氯化钙溶液时应用蒸馏水；    
②不能用酒精灯大火连续加热配制海藻酸钠溶液，否则可能发生焦糊，海藻酸钠溶解应用小火或间断加热；
③海藻酸钠溶液冷却至常温再加入酵母细胞，否则高温会杀死细胞；
④注射器中的海藻酸钠和酵母细胞的混合物应滴入氯化钙溶液中，而非蒸馏水中．
（3）①加入反应液的浓度不能过高，否则浓度过高酵母细胞因失水过多而死亡．
②为了使实验中所用到的固定化酵母细胞可以反复运用，实验过程一定要在无菌条件下进行．
故答案为：
（1）包埋法 
（2）①配制CaCl₂溶液时应用蒸馏水    ②海藻酸钠溶解应用小火或间断加热    ③海藻酸钠溶液冷却至常温再加入酵母细胞    ④注射器中的海藻酸钠和酵母细胞的混合物应滴入CaCl₂溶液
（3）①可以防止酵母菌细胞过度失水死亡  ②无菌

点评 本题考查细胞固定化技术的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力．