题目内容
依据基因工程技术和细胞工程有关原理回答下列问题：
（1）基因工程操作的基本步骤是：
① ____ __； ② ____；
③ ____； ④ __。
（2）获取目的基因途径有 、 。
（3）下图是将人类的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图，所用的载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒导入细菌B后，其上的基因能得到表达。简述重组质粒的主要过程包括：
① ；
② ；
③ 。
④导入细菌B细胞的目的基因成功表达的标志是什么？ ______。
（1）获取目的基因 构建基因表达载体 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 （2）直接分离 人工合成 （3）①用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个有粘性末端的切口 ②用同种限制酶切割目的基因，产生相同的粘性末端 ③将切下的目的基因片段插入到质粒的切口处，再加入适量的DNA连接酶，使质粒与目的基因结合成重组质粒 ④受体细胞合成人的生长激素
【解析】（1）基因工程的操作步骤有：获取目的基因、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
（2）获取目的基因的途径有直接分离、人工合成。
（3）构建重组质粒的步骤有：①用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个有粘性末端的切口②用同种限制酶切割目的基因，产生相同的粘性末端③将切下的目的基因片段插入到质粒的切口处，再加入适量的DNA连接酶，使质粒与目的基因结合成重组质粒④受体细胞合成人的生长激素。
