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17.近十年来,PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室里的一种常规手段,其原理是利用DNA半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如图),在很短的时间内,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验所需要的遗传物质不再受限于活的生物体.(1)PCR技术能把某一DNA片段进行扩增,依据的原理是:DNA分子具有双螺旋结构和DNA分子中碱基的互补配对
(2)加热使DNA双链打开,这一步是打开氢键,称为解旋,在细胞中是在解旋酶的作用下使此键断裂.
(3)当温度降低时,引物与模板3’端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成2个DNA分子,此过程中加入四种脱氧核苷三磷酸的目的是既是原料,又能提供能量,遵循的原则是碱基互补配对原则.
(4)PCR技术的必要条件,除了模板、原料、ATP、酶以外,至少还需要三个条件.即:液体环境、适宜的温度和酸碱度.
(5)PCR一般要经历三十多次循环,每次循环可分为变性、退火、延伸三个步骤.
分析 PCR技术:
1、概念:PCR全称为聚合酶链式反应,是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术.
2、原理:DNA复制.
3、前提条件:要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物.
4、条件:模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶).
5、过程:①高温变性:DNA解旋过程;②低温复性:引物结合到互补链DNA上;③中温延伸:合成子链.PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶,高温条件下氢键可自动解开.
解答 解:(1)PCR技术能把某一DNA片段进行扩增,依据的原理是:DNA分子具有双螺旋结构和DNA分子中碱基的互补配对.
(2)加热使DNA双链打开,这一步是打开氢键,称为解旋,在细胞中是在解旋酶的作用下使此键断裂.
(3)当温度降低时,引物与模板3’端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成2个DNA分子,此过程中加入四种脱氧核苷三磷酸的目的是既是原料,又能提供能量,遵循的原则是碱基互补配对原则.
(4)PCR技术的必要条件,除了模板、原料、ATP、酶以外,至少还需要三个条件.即:液体环境、适宜的温度和酸碱度.
(5)PCR一般要经历三十多次循环,每次循环可分为变性、退火、延伸三个步骤.
故答案为:
(1)DNA分子具有双螺旋结构和DNA分子中碱基的互补配对
(2)氢 解旋 解旋酶
(3)3’既是原料,又能提供能量 碱基互补配对原则
(4)温度 酸碱度
(5)变性、退火和延伸
点评 本题结合图解,考查PCR技术的相关知识,要求考生识记PCR技术的概念、原理、条件及过程,能结合所学的知识准确答题,属于考纲识记层次的考查.
练习册系列答案
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