Question

已知玉米因受到玉米螟危害而减产，玉米螟食用某种原核生物分泌的?-蛋白后死亡．因此，可将?-蛋白基因转入到玉米体内，使玉米获得抗玉米螟危害的能力．请据此回答下列问题：
（1）为了获得?-蛋白的基因，在已知?-蛋白的氨基酸序列的基础上，推测出?-蛋白的序列，据此可利用

 

方法合成目的基因．获得?-蛋白的基因还可用

 

、

 

方法．
（2）如图，若用限制酶E和F从原核生物基因组DNA上切下?-蛋白的基因，并将之取代质粒Z1上相应的E-F区域 （0.4kb，1kb=1000对碱基）．（图中E、F、G、H是4种识别序列完全不同的限制酶及其部分识别位点）
①此时所形成的重组质粒Z2的大小为5.4kb，问目的基因的大小是

 

；
②若用限制酶E和F处理Z2，则会出现Z2

 

；
A．既能被E也能被F切开           B．能被E但不能被F切开
C．既不能被E也不能被F切开       D．能被F但不能被E切开
③若用限制酶G切割Z1，可得到一种2.5kb的DNA片段；若用限制酶G切割Z2，可得到2.5kb、1.4kb和0.1kb三种片段，问Z2上有

 

个限制酶G识别位点．
（3）若用含有重组质粒的土壤农杆菌直接感染玉米植株的根部伤口，则该植株的种子中

 

（填“含有”或“不含”）?-蛋白基因．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：1、获得目的基因的方法：①从基因文库中获取②利用PCR技术扩增③人工合成（化学合成）．原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．
2、农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上．

解答： 解：（1）目的基因较小，而且核苷酸序列已知的情况，可以用人工合成法合成目的基因．还可以通过基因文库中直接获取、PCR技术扩增目的基因．
（2）①根据图示．Z2由Z1中的EF段被目的基因替换而成的．假设目的基因的大小为Xkb，根据图示可知：3.2+0.8+0.6+x=5.4，可得x=0.8kb．
②构建重组质粒时用同种限制酶切割目的基因和质粒，使它们具有相同的末端，再用DNA连接酶链接形成重组质粒．由Z2的形成过程图，可知，?-蛋白的基因是用限制酶E和F从原核生物基因组DNA上切下，并取代质粒Z1上相应的E-F区域．如果用限制酶E和F处理Z2，可能E、F两处位点再次被切开．
③已知重组质粒Z2的大小为5.4kb，若用限制酶G切割Z2，可得到2.5kb、1.4kb和0.1kb三种片段，可推知共产生四各片段分别为：一段为2.5kb、两段为1.4kb和一段为0.1kb，因此限制酶G将环状的Z2切割四个位点，获得如上的三种片段．
（3）农杆菌易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力．
故答案为：
（1）人工合成　基因文库　   PCR
（2）①0.8kb   ②A      ③4     
（3）不含

点评：本题着重考查了基因工程相关方面的知识，意在考查考生能识记并理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成一定知识网络的能力，并且具有一定的分析能力和理解能力．