Question

14．基因工程是在现代生物学、化学和工程学基础上建立和发展起来的，并有赖于微生物学理论和技术的发展，现在基因工程在动植物育种上有广泛而重要的应用．基因工程基本操作流程如图所示，请据图分析回答问题．
（1）图中A是运载体，最常用的是质粒．
（2）过程②用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶．
（3）在基因工程中，核心步骤是基因表达载体的构建．其组成除了目的基因外，还必须有启动子、标记基因以及终止子等，其中启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位．
（4）转基因绵羊的培育过程，其中③过程常用的方法是显微注射技术，使用的绵羊受体细胞为受精卵．
（5）转基因耐盐棉的培育过程，其中③过程常用的方法有：农杆菌转化法和基因枪法（或花粉管通道法）法．为了确定转基因耐盐水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的耐盐基因（目的基因）作探针进行分子水平的检测．又要用一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中）方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性．
（6）用于基因工程的细菌，需要先用Ca⁺处理，使其成为感受态细胞，容易接受重组DNA．

Answer 1

分析 分析题图：图示是基因工程的基本操作流程，其中A为运载体；①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导人受体细胞，④目的基因的检测与鉴定．

解答 解：（1）分析图解，基因工程中需要将目的基因和运载体构建成重组质粒，因此图中A是运载体，常用的运载体是质粒．
（2）基因表达载体构建的过程需要的工具酶有限制酶和DNA连接酶．
（3）在基因工程中，核心步骤是基因表达载体的构建．其组成除了目的基因外，还必须有启动子、标记基因以及终止子等，其中启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位．
（4）转基因绵羊的培育过程，使用的绵羊受体细胞为受精卵，将目的基因导入受精过程中常用的方法是显微注射技术．
（5）转基因耐盐棉的培育过程，目的基因导入植物细胞过程常用的方法有：农杆菌转化法和基因枪法（或花粉管通道法）法．为了确定转基因耐盐水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的耐盐基因（目的基因）作探针进行分子水平的检测．又要用一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中）方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性．
（6）用于基因工程的细菌，需要先用Ca⁺处理，使其成为感受态细胞，容易接受重组DNA．
故答案为：
（1）运载体    质粒
（2）限制酶和DNA连接酶
（3）基因表达载体的构建      标记基因    终止子    RNA聚合酶
（4）显微注射技术     受精卵
（5）基因枪法（或花粉管通道法）     耐盐基因（目的基因）        一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中）
（6）Ca⁺

点评 本题结合基因工程的基本操作流程图，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、工具、操作步骤及应用；明确目的基因可以在受体细胞中得到表达的生理基础．