Question

31.（16分）T-DNA可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植物形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子（称为T₁代）。

（1）为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除       ，因为后者产生的        会抑制侧芽的生长。

（2）为筛选出已转化的个体，需将T 代播种在含        的培养基上生长，成熟后自交，收获种子（称为T₂代）。

（3）为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T 代播种在含        的培养基上，获得所需个体。

（4）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与      植株进行杂交，再自交       代后统计性状分离比。

（5）若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性       。

（6）根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是：提取      植株的DNA，用限制酶处理后，再用       将获得的DNA片段连接成环（如右图）以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链DNA片断中选取    作为引物进行扩增，得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。

Answer 1

【答案】31．（16分）

（1）顶芽     生长素   （2）（一定浓度的）除草剂

（3）（一定浓度的）    （4）野生型    1

（5）降低（60突变体      DNA连接酶      B、C

【解析】(1)顶芽产生的生长素会在侧芽积累使侧芽的生长受到抑制。(2)T₂代与T₁代相比，含有抗除草剂基因，可以在含(一定浓度的)除草剂的培养基上将其分离开来，再通过自交得到纯合体。(3)与(2)原理相同。(4)见答案。T—DNA的插入造成了抗盐基因功能丧失，植物的抗盐能力下降。(6)根据图示A的合成方向，要扩增目的基因，应选择B、C作为引物。