Question

回答下列有关遗传信息传递和表达的问题。

Ⅰ．基因工程操作步骤中，需要从受体细胞群中筛选出已获得目的基因的细胞，图中①－③示一种筛选方法的过程。pBR322质粒含有两个抗性基因，分别是Amp（氨苄青霉素）抗性基因和Tet（四环素）抗性基因，其中在Tet抗性基因上有下列目的基因的插入位点（插入将导致Tet抗性基因功能性失活），请回答：

1．图中①过程所需的酶是________。

2．经过①过程，pBR322质粒可能出现的两种结果A是________。

3．②过程表示用含四环素（使细胞停止生长，但不致死）和环丝氨酸（使生长的细胞致死）的培养基中培养细菌甲，则培养结果C表示在培养基中可能存活的细菌包括________。

4．若要进一步筛选出符合要求的受体细胞D，则③过程需要做的处理是（请参照过程②的方法）________。

Ⅱ．基因工程中使用的Ⅱ型限制性核酸内切酶通常可以识别长度为4－8个核苷酸的特异序列。下面示限制酶Sau3AⅠ对DNA片段切割的结果。

5．请分析，Sau3AⅠ的识别序列以及切割位点（用“↓”表示）是________。

Ⅲ．下表列出了几种限制酶的识别序列及其切割位点，图1（含两个抗性基因的质粒）和图2（含目的基因的外源DNA）中箭头表示相关限制酶的酶切位点。

6．据图1和图2分析，为了使目的基因和质粒实现定向连接和便于受体细胞的筛选，切割质粒的限制酶应选用________，切割含目的基因的外源DNA的酶应选用________。

Answer 1

答案：
解析：

　　1、DNA连接酶（DNA连接酶和限制酶）

　　2、目的基因成功插入（重组质粒）、目的基因插入不成功（没有发生重组的质粒）（2分）

　　3、导入不成功的细菌和导入了重组质粒的细菌（2分）

　　4、将存活的细菌转移到含氨苄青霉素的培养基上培养

　　5、（2分）

　　6、XbaⅠ和BclⅠ　XbaⅠ和BclⅠ