题目内容
【题目】下图是南通某中学生物兴趣小组进行的DNA粗提取实验,其中SDS(—种表面活性剂)除了能瓦解细胞膜和核膜,还能与脂质和蛋白质结合。当SDS遇到钾离子时,钾离子可以置换SDS中的钠离子,产生不溶于水的PDS沉淀。请回答下列问题:
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(1)实验中,向剪碎的猪肝中加入食盐的主要作用是_______。将猪肝匀浆放入65℃水浴锅中水浴lOmin以除去部分杂质的主要实验原理是________________。
(2)方法一的步骤①中加入洗涤剂的作用是_________。方法三的步骤③中,离心后应取____________。
(3)方法一、二获得的絮状物均带黄色,从DNA在细胞中的存在形式分析,杂质分子最可能是________,可用___________试剂鉴定。
(4)要比较三种方法获得的絮状物中DNA含量,请写出实验思路:_________________________________。
【答案】 溶解DNA 蛋白质在65℃高温下会变性而DNA能耐受这一温度 瓦解细胞膜和核膜 上清液 蛋白质 双缩脲 分别取等量的三种絮状物,并用等量的2mol/LNaCl溶液溶解;再向各试管中加入等量的二苯胺试剂并水浴加热;比较三支试管中蓝色的深浅
【解析】试题分析:根据题干信息分析,SDS是—种表面活性剂,既可以瓦解细胞膜和核膜,还可以与脂质和蛋白质结合;其含有的钠离子可以被钾离子置换,进而产生不溶于水的PDS沉淀。
(1)在DNA粗提取实验中,向剪碎的猪肝中加入食盐可以溶解DNA ;蛋白质在65℃高温下会变性,而DNA能耐受这一温度,因此将猪肝匀浆放入65℃水浴锅中水浴lOmin可以除去蛋白质类的杂质。
(2)方法一的步骤①中加入洗涤剂,可以瓦解细胞膜和核膜;方法三的步骤③中,SDS在氯化钾溶液中形成不溶于水的PDS沉淀,又因为SDS能瓦解细胞膜、核膜,并能与脂质和蛋白质结合,应该将该沉淀物除去,因此离心后应该取上清液。
(3)细胞中的DNA主要存在于染色体上,染色体的主要成分是DNA和蛋白质,因此该杂质最可能是蛋白质,可以用双缩脲试剂进行鉴定。
(4)比较三种方法获得的絮状物中DNA含量,可以利用二苯胺试剂进行鉴定,实验思路如下:分别取等量的三种絮状物,并用等量的2mol/LNaCl溶液溶解;再向各试管中加入等量的二苯胺试剂并水浴加热;比较三支试管中蓝色的深浅。