Question

某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。
(1)采样与培养：将采集的土样混匀后称取1 g，置于经过____________法灭菌处理的____________(填“固体”或“液体”)培养基中，28 ℃振荡培养。
(2)接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行______处理。之后，将菌液涂布接种于以_________为唯一碳源的固体培养基上，30 ℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈___________状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计___________作为空白对照。
(3)筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是_________，则说明此种菌能够_____________。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用_____________法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。

Answer 1

（15分，除特别标注外，其余每空1分）（1）高压蒸汽灭菌  液体（2分）  （2）系列稀释（或“梯度稀释”）（2分）  淀粉 倒置  未接种的空白培养基（或“接种等量无菌水的培养基”）（2分）
（3）出现透明圈（2分）  分泌淀粉酶（2分）  （平板）划线（2分）

解析试题分析：（1）分离芽孢杆菌时应选择液体培养基并经高压蒸汽灭菌。
（2）为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行系列稀释处理。由于筛选分分泌淀粉酶的芽孢杆菌，应将菌液涂布接种于以淀粉为唯一碳源的选择培养基上。为避免污染，需将培养皿倒置放置，另外，为提高实验的可信度，还需设计未接种的空白培养基作为空白对照。
（3）由于芽孢杆菌能分泌淀粉酶，故在菌落周围无淀粉，加入碘液后不会出现蓝色反应，而会出现透明圈。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用平板划线法接种于新的培养基上可进一步进行纯化。
考点：本题考查细菌的分离和纯化、培养等知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。