题目内容

5．R一7是家蚕体内的一种小分子非编码RNA，可与某些mRNA尾端的一段非编码序列（3′-UTR）结合，进而影响基因的表达．为研究R一7是否影响家蚕基因B（调控家蚕眼睛发育）的表达，科研人员将基因B中对应3′一UTR的刀NA片段与荧光素酶基因（R一7不影响荧光素酶基因的表达）重组后导入家蚕胚胎细胞观察其表达结果．请回答：
（l）利用PCR技术扩增基因B对应3′一UTR的DNA片段，应先依据该基因的一段核甘酸序列合成引物．
（2）利用限制酶（或限制性核酸内切酶）和DNA连接酶可将上述DNA片段插入荧光素酶基因表达载体（如图1）上的位点2，构建重组载体．
（3）将重组载体与R一7共同导入家蚕胚胎细胞，同时应设置两个对照组，即将荧光素酶基因表达载体、重组载体分别导入两组家蚕胚胎细胞．
（4）科研人员分别从实验组和对照组细胞中提取蛋白质，经处理检测后获得相对荧光值（在适宜条件下，荧光素酶可催化荧光素发生氧化反应并发出荧光），其结果如图2．
（5）依据实验结果可推断，R一7影响基因B的表达，即通过遵循碱基互补配对原则，R一7与基因B所转录的mRNA的3’一uTR结合，进而抑制（填“促进”或“抑制”）基因B的表达．

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（l）利用PCR技术扩增基因B对应3′一UTR的DNA片段，应先依据该基因的一段核甘酸序列合成引物．
（2）构建基因表达载体时，首先需要用限制酶切割运载体和含有目的基因的外源DNA分子，其次需要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子；目的基因插入的位置应该在启动子和终止子之间，且不能破坏荧光素基因，因此可将上述DNA片段插入荧光素酶基因表达载体上的位点2，构建重组载体．
（3）将重组载体与R一7共同导入家蚕胚胎细胞，同时应设置两个对照组，即将荧光素酶基因表达载体、重组载体分别导入两组家蚕胚胎细胞．
（4）基因表达产物是蛋白质．
（5）基因表达是指基因控制蛋白质的合成，包括转录和翻译两个步骤．R一7影响基因B的表达，即通过遵循碱基互补配对原则，R一7与基因B所转录的mRNA的3’一uTR结合，使基因B表达的翻译过程失去模板，因此R一7抑制基因B的表达．
故答案为：
（1）引物
（2）限制酶（或限制性核酸内切酶）和DNA连接酶    2 
（3）荧光素酶基因表达载体   重组载体
（4）蛋白质 
（5）碱基互补配对   抑制

点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，掌握基因工程技术的相关应用，能结合图中信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．

练习册系列答案
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15．关于试管动物技术的叙述，错误的是（　　）
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C．胚胎分割的结果可以看作是动物无性生殖或动物克隆
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16．近年，我国不少地区出现手足口病，手足口病是由肠道病毒引起的传染病．该病毒侵入人体后，可引起人体的免疫反应时（　　）
A．B细胞增殖分化成浆细胞
B．T细胞大量合成并分泌与该病毒特异性结合的抗体
C．B细胞产生的淋巴因子与肠道病毒特异性结合，并清除病毒
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13．当快速牵拉骨骼肌时，会在d处记录到电位变化过程．回答下列问题：
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（2）当快速牵拉骨骼肌时，d处会记录到电位变化，表明骨骼肌中分布有感受器（填结构名称），c处可检测到明显增多的物质是．
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20．如图表示甲状腺激素的分泌过程，①②③表示相关激素，请回答下列问题．
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10．下列有关细胞的分化、衰老、癌变和凋亡的叙述，正确的是（　　）
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B．衰老细胞内染色质固缩会影响DNA的复制和转录过程
C．皮肤上的“老年斑”是细胞凋亡的结果
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17．胡萝卜素可以溶于乙醇和丙酮，但乙醇和丙酮均不能用于胡萝卜素的萃取，原因是乙醇和丙酮均是水溶性有机溶剂，萃取中能与水混溶而影响萃取效果；石油醚、醋酸乙酯、乙醚、苯和四氯化碳五种有机溶剂中，石油醚最适宜用来提取胡萝卜素，原因是石油醚的沸点最高，在加热萃取时不易挥发．
14．下列有关玉米的遗传信息的叙述，正确的是（　　）
A．玉米的遗传信息只存在于细胞核中
B．玉米叶形成过程中有64个编码氨基酸的密码子参与
C．玉米体内的tRNA上存在反密码子
D．玉米体有61种tRNA

下面关于蛋白质分子结构与功能的叙述，错误的是（ ）

A．不同蛋白质含有的氨基酸数量不尽相同

B．有些结构不同的蛋白质具有相似的功能

C．组成蛋白质的氨基酸可按不同的排列顺序脱水缩合

D．组成蛋白质的氨基酸之间可按不同的方式脱水缩合

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