Question

回答下列（一）、（二）小题：

（一）普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图1所示）

（1）图1中,为达到筛选目的,平板内的固体培养基应以 作为唯一碳源。②、③过程需重复几次,目的是 。

（2）某同学尝试过程③的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图2所示。该同学的接种方法是 ；推测该同学接种时可能的操作失误是 。

（3）以淀粉为原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵,发酵罐需要先排气,其原因是 。

（4）上述工程酵母菌培养过程中，有关操作正确的是

A．玻璃刮刀用火焰灼烧进行灭菌

B．培养基分装到培养皿后进行灭菌

C．倒平板和取菌液都必须在酒精灯火焰旁进行

D．获得的菌种如果需要保存，可置于37℃恒温保存

（二）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：

（1）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用 两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过 酶作用后获得重组质粒。

（2）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加 。

（3）若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为 ，对于该部位，这两种酶 （填“都能”、“都不能”或“只有一种能”）切开。

（4）若用Sau3A I切图1质粒最多可能获得 种大小不同的DNA片段。

（5）基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于 。

Answer 1