题目内容
4.实验原理:固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物作用下溶解,会在菌落周围形成透明圈,透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值(D/d)代表微生物溶解磷的能力大小.
实验步骤:步骤1 取某地区土样5g制得土壤溶液后稀释,取稀释液1mL接种到基础培养基A上,在适宜温度下培养72h.步骤2在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种,培养3~4d后观察菌落特征和透明圈的大小,初步筛选出三种优良解磷菌株(如表).
| 菌株 | 透明圈直径 (D)单位:mm | 菌落直径 (d)单位:mm | D/d |
| 甲 | 22.8 | 15.3 | 1.5 |
| 乙 | 20.7 | 7.7 | 2.7 |
| 丙 | 8.2 | 7.5 | 1.1 |
(1)为了筛选出所需菌株,培养基中唯一的磷源应该是难溶性磷酸盐,步骤1中接种方法是稀释涂布平板法,步骤2中接种环的灭菌方法是灼烧灭菌.
(2)土壤中的磷以PO43-(HPO42-或H2PO4-)形式被植物细胞吸收,吸收后可用于合成核酸、磷脂、ATP、NADPH等.(填出2种含磷的有机物).
(3)根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是乙.为了保持所得菌种的纯净,需要进行菌种的保藏.临时保藏时,要将菌种接种到试管的固体斜面培养基上,长成菌落后放入4℃的冰箱中;长期保存时可以采用甘油管藏的方法.
(4)实验中所用的固体培养基往往是在液体培养基中加入凝固剂琼脂制备的,培养基上出现的单一菌落可以看做一个种群(填“种群”、“群落”、“生态系统”).
分析 分析题图和表格:“透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值($\frac{D}{d}$)代表微生物溶解磷的能力大小”,结合表格可知,菌株乙的比值($\frac{D}{d}$)最大,说明菌株乙的溶解磷的能力最大.
解答 解:(1)为了筛选出所需菌株,培养基中唯一的磷源应该是难溶性磷酸盐,步骤1中“制得土壤溶液后稀释,取稀释液lmL接种到基础培养基A上”,由此可见接种方法是稀释涂布平板法,步骤2中接种环的灭菌方法是灼烧灭菌.
(2)土壤中的磷以离子形式被植物细胞吸收,磷离子的存在形式有PO43-(HPO42-或H2PO4-),吸收后可用于合成核酸、磷脂、ATP、NADPH等含磷的有机物.
(3)“透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值($\frac{D}{d}$)代表微生物溶解磷的能力大小”,结合表格可知,菌株乙的比值($\frac{D}{d}$)最大,说明菌株乙的溶解磷的能力最大.为了保持所得菌种的纯净,需要进行菌种的保藏.临时保藏时,要将菌种接种到试管的固体斜面格养基上,长成菌落后放人4℃的冰箱中;长期保存时可以采用甘油管藏的方法.
(4)固体培养基往往加人琼脂作为凝固剂.培养基上出现的单一菌落可以看做一个种群.
故答案为:
(1)难溶性磷酸盐 稀释涂布平板法 灼烧灭菌
(2)PO43-(HPO42-或H2PO4-) 核酸、磷脂、ATP、NADPH等
(3)乙 固体斜面 甘油管藏
(4)琼脂 种群
点评 本题结合实验表格结果考查了微生物培养和分离的有关知识,要求考生识记磷元素在土壤中的存在形式以及含磷的有机物,掌握微生物分离与纯化的方法,识记菌种的保藏的方法.
练习册系列答案
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