题目内容
【题目】基因工程需要用到多种工具，质粒就是一种常见的工具——运载体，某一质粒载体如图所示,外源DNA插入Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamHⅠ酶切后,与用BamHⅠ酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应。
（1）用得到的混合物直接转化大肠杆菌,结果可能将会得到___类大肠杆菌（大致类型，不进行数量、基因长度区分）。
（2）要筛选导入了含有目的基因的重组质粒的大肠杆菌，其特点是能抗_____而不能抗_____；要挑选出目的菌，必须在___（物理性质）培养基上进行。
（3）图中的三个DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制性核酸内切酶的识别序列与切割位点,经BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被______酶切后的产物连接,理由是_________。
（4）重组质粒导入动物细胞方法一般是______，最后该动物细胞生长发育为转基因动物,进入泌乳期后,可以通过分泌乳汁来生产所需要的药品,这些药品的化学本质大多为。
【答案】 4（未被转化、仅含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒） 氨苄青霉素 四环素 固体 Sau3AⅠ 两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端（或者产生的黏性末端能碱基互补配对） 显微注射法 蛋白质
【解析】本题考查了基因工程的有关知识，要求考生能够识记质粒作为运载体的条件，掌握目的基因检测和鉴定的方法，再结合题干信息准确分析。
（1）用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是仅含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒。
（2）BamHⅠ酶会破坏四环素抗性基因，因此含有目的基因的重组质粒的大肠杆菌不能产生抗四环素物质，氨苄青霉素抗性基因没有破坏，能产生抗氨苄青霉素物质，因此该大肠杆菌能抗氨苄青霉素而不能抗四环素。固体培养基一般用于分离微生物，因此要挑选出目的菌，必须在固体培养基上进行。
（3）分析图解可知，限制酶Sau3AI和BamHI酶切割后形成的黏性末端相同，因此经BamHI酶切割得到的目的基因可以与表达载体被Sau3AI酶切后的产物连接。
（4）重组质粒导入动物细胞方法一般是显微注射法，通过分泌乳汁来生产所需要的药品的化学本质大多为蛋白质。
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