题目内容
【题目】 Bt毒素是由苏云金芽胞杆菌产生的一种毒蛋白，对多种昆虫具有较强的杀伤力，而对人和其它脊椎动物没有毒性。
（1）以Bt毒蛋白为有效成分的农药长期使用，会导致害虫种群____，使药效减弱直至丧失，无法在生产中继续使用。
（2）以家蚕为材料，研究昆虫抗药性遗传特性。测定生命力大致相同的多品种家蚕幼虫致死50%的Bt浓度（LC50），结果如下：
家蚕品种 | A | B | C | D | E | F | G | H |
LC50（mg/L） | 59．4 | 37．5 | 94．2 | 118．6 | 118．6 | 118．7 | 129．0 | >375 |
1研究人员欲选择敏感型和抗药型家蚕为亲本进行杂交实验，据上表结果，最好选择家蚕品种是_______________。
②杂交实验及结果如下表：
亲本 | 实验一 ♀抗药型 ×♂敏感型 | 实验二 ♀敏感型 ×♂抗药型 | 实验三 实验一的 F1×抗药型 | 实验四 实验二的 F1×敏感型 | 实验五 实验一的 F1自交 | 实验六实验二的F1自交 | |
子代 | 抗药型 | 0 | 0 | 67 | 0 | 37 | 34 |
敏感型 | 80 | 80 | 83 | 150 | 113 | 116 | |
实验一和实验二的结果表明，家蚕抗药型是由位于____________染色体上的____性基因控制的；实验____的结果表明，F1产生两种配子且比例为1：1
（3）Bt毒蛋白与家蚕幼虫的中肠细胞特异性受体结合，使细胞膜穿孔，细胞裂解，幼虫死亡。为从分子水平上阐明家蚕产生抗药性的原因，研究人员从实验一亲本________________细胞中提取总RNA，获取cDNA，测定亲本受体基因碱基序列如图。
起始密码子 | 终止密码子 | 酪氨酸密码子 |
AUG/GUG | UAA/UAG | UAU/UAC |
从分子水平推测家蚕抗药性产生的原是敏感型受体基因中插入3个碱基对，导致____（填写变异类型），进而在受体蛋白中插入一个氨基酸（酪氨酸），受体蛋白结构改变，使受体不能与Bt毒蛋白结合而产生抗药性。
（4）依据Bt受体基因设计的靶向sgRNA，可以与限制酶Cas9结合，定点切除受体基因的39个核苷酸。sgRNA和Cas9mRNA的混合物注射到____型家蚕受精卵中，若其发育成的家蚕幼虫表现为________，则进一步证明上述推测成立。
（5）基因编辑技术能精确靶向修饰生物体基因组特定位点，人为改造生物体的遗传信息。请从利或弊某一方面说明该技术的应用是一把“双刃剑”： ____。
【答案】基因频率（定向）改变 品种B和品种H 常 隐 三（或五或六） 中肠 基因突变 敏感 抗药（型） 利：生物育种（育种方向）、基因诊断、基因治疗、靶向治疗、药物生产（医药方向）。弊：基因污染、生态环境破坏、“外来物种入侵”、产生新的致病菌（环境方向）、基因歧视（伦理方向）、食品安全（食品安全健康方向）
【解析】
1、在自然选择的作用下，种群的基因频率会发生定向改变，导致生物朝着一定的方向不断进化。
2、由题意可知，SgRNA与限制酶Cas9结合，可定点切除受体基因的39个核苷酸，使受体基因功能丧失。
（1）由于害虫会发生基因突变，使种群中出现含抗Bt毒蛋白基因的个体。以Bt毒蛋白为有效成分的农药长期使用对害虫起选择作用，会使害虫的抗Bt毒蛋白基因频率升高，使药效减弱直至丧失，无法在生产中继续使用。
（2）①由表格的内容可知，用Bt处理不同品种家蚕幼虫，使B品种家蚕幼虫出现半数死亡的Bt浓度（37.5mg/L）最小；使H品种家蚕幼虫出现半数死亡的Bt浓度（大于375mg/L）最大。因此，研究人员欲选择敏感型和抗药型家蚕为亲本进行杂交实验，最好选择B品种家蚕为敏感型亲本，H品种家蚕为抗药型家蚕为亲本。
②由实验一和实验二可知，敏感型和抗药型家蚕杂交，子代家蚕全为敏感型，说明敏感型为显性性状，抗药型为隐性性状。正交和反交，子代的表现型及比例相同，说明家蚕敏感型和抗药型的遗传与性别无关，则这对等位基因位于常染色体上。因此，家蚕抗药型是由位于常染色体上的隐性基因控制的。实验三中，杂合子（F1）与隐性纯合子（抗药型）杂交，子代中抗药型：敏感型=1：1，说明F1产生两种配子且比例为1：1。或实验五、六中，杂合子F1自交，子代中抗药型：敏感型=1：3，说明F1产生两种配子且比例为1：1。
（3）由“Bt毒蛋白与家蚕幼虫的中肠细胞特异性受体结合，使细胞膜穿孔，细胞裂解，幼虫死亡”可知，应从实验一亲本中肠细胞中提取总RNA，获取cDNA，测定亲本受体基因碱基序列。由题图可知，抗药型受体基因碱基序列比敏感型受体基因多了3个碱基对，为ATA/TAT，且密码子UAU编码酪氨酸。由此可推测家蚕抗药性产生的原因敏感型受体基因中插入3个碱基对，导致基因突变，进而在受体蛋白中插入一个酪氨酸，受体蛋白结构改变，使受体不能与Bt毒蛋白结合而产生抗药性。
（4）由题意可知，sgRNA与限制酶Cas9结合，定点切除受体基因的39个核苷酸，使受体基因不能编码合成受体。因此，sgRNA和Cas9mRNA的混合物应注射到敏感型家蚕受精卵中。若其发育成的家蚕幼虫表现为抗药型，则说明受体基因不能编码合成受体，家蚕幼虫的中肠细胞无受体与Bt毒蛋白结合而产生抗药性，进一步证明上述推测成立。
（5）基因编辑技术在农牧业、医药和医学、环境保护等领域有广泛的应用，例如生物育种、基因诊断、基因治疗、药物生产等。基因编辑技术在给人类的生产和生活带来益处的同时，也使人们产生关于基因编辑技术安全性等方面的担忧。例如，基因污染、生态环境破坏、“外来物种入侵”、产生新的致病菌、基因歧视、食品安全（食品安全健康方向）。
