题目内容

【题目】影印培养法是一种通过盖印章的方式,达到在一系列培养皿平板的相同位置上出现相同遗传型菌落的接种和培养方法。科学家用影印培养法研究大肠杆菌的抗药性变异与抗生素作用的关系,具体实验步骤如下。

步骤1:取空白培养基若干分别标记A1A2A3……;取加入青霉素的空白培养基若干分别标记B1B2B3……

步骤2:将待测大肠杆菌培养液接种在A1培养基表面,在适宜条件下培养一段时间,培养基的表面会出现一些菌落。

步骤3:用灭菌后的丝绒包上棉花在A1上轻轻盖一下,再在B上轻轻盖一下,将A1的菌落位置准确“复制”到B1中。培养一段时间后,B1中一定部位出现了少量菌落。

步骤4:根据B1中菌落的位置,将A1中对应位置的菌落取出(见图示),均匀涂抹在A2的表面,培养一段时间后,培养基表面又会出现许多菌落。

步骤5:反复重复步骤34

下列叙述正确的是(

A.序号越大的B组培养基上的菌落数越多

B.使用影印培养法可以有效的选择出产生抗药性变异的大肠杆菌

C.多次反复操作后,未接触青霉素的A组与相同序号的B组菌落数越来越接近

D.该实验证明大肠杆菌的抗药性变异早于抗生素的选择作用

【答案】ABCD

【解析】

影印培养法可以做到在另一个培养基上完全复制上一个培养基的菌落,包括菌落的种类和位置,通过实验步骤可以观察到A培养基为空白培养基,B培养基为加入青霉素的选择培养基,在该培养基上生长的菌落具有青霉素抗性。

AB组培养基上的菌落来自于A组中生长的抗青霉素的菌种,根据第B1组抗青霉素菌落的位置将A1中对应位置的菌落取出,均匀涂抹在A2的表面,则A2接种的全为来自于抗青霉素菌落的菌种,其中大多部分都具有青霉素抗性,因此在B2上生长的菌落更多,重复操作则序号越大的B组培养基上的菌落数越多,A正确;

B、由于影印培养法对菌落位置和种类的定性很准确,所以使用该法可以有效的选择出产生抗药性变异的大肠杆菌,B正确;

C、反复操作以后,在A组上留出的具有抗青霉素能力的菌种越爱越多,抗性越来越强,达到一定次数后可能会使A上生长的菌落全部具有很强的抗青霉素抗性,C正确;

D、由于在B培养基上进行青霉素选择之前,抗青霉素菌落就已经在A中存在,所以大肠杆菌的抗药性变异早于抗生素的选择作用,D正确;

故选ABCD

练习册系列答案
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【题目】图示pIJ702是一种常用质粒,其中tsr为硫链丝菌素(一种抗生素)抗性基因;mel为黑色素合成基因,其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落;而限制酶SacⅠ、 SphⅠ, BglⅠ在pIJ702上分别只有一处识别序列。回答下列问题。

1

pIJ702

pZHZ8

Bgl

57kb

67kb

2

固体培养基中硫链丝菌素浓度(μg/mL

0

1

2

5

10

不含质粒的链霉菌生长状况

+++++

+++

+

-

-

“+”表示生长;“-”表示不生长。

1)限制性内切核酸酶可以识别双链DNA中特定核苷酸序列,并使每条链中特定部位的两个核苷酸之间_______的断裂,切割形成的末端有_______两种。

2)以SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因置换质粒PIJ702上长度为04kbSac/sphⅠ片段,构建重组质粒pZHZ8。上述两种质粒的限制酶酶切片段长度见表1。由此判断目的基因的片段长度为_____kb,判定目的基因中含有一个BglⅡ切割位点的理由是____________________________

3)导入目的基因时,首先用______处理链霉菌使其成为感受态细胞,再将重组质粒pZHZ8溶于________中与感受态细胞混合,在一定的温度下可以促进链霉菌完成______过程。

4)不含质粒的链霉菌在含硫链丝菌素的固体培养基上生长状况如表2所示。若要筛选导入pzHZ8的链霉菌细胞,所需硫链丝菌素浓度至少应在______μg/mL以上,挑选成功导入pZHZ8的链霉菌的具体方法是________________________

【题目】 Bt毒素是由苏云金芽胞杆菌产生的一种毒蛋白,对多种昆虫具有较强的杀伤力,而对人和其它脊椎动物没有毒性。

1)以Bt毒蛋白为有效成分的农药长期使用,会导致害虫种群____,使药效减弱直至丧失,无法在生产中继续使用。

2)以家蚕为材料,研究昆虫抗药性遗传特性。测定生命力大致相同的多品种家蚕幼虫致死50%Bt浓度(LC50),结果如下:

家蚕品种

A

B

C

D

E

F

G

H

LC50mg/L

594

375

942

1186

1186

1187

1290

>375

1研究人员欲选择敏感型和抗药型家蚕为亲本进行杂交实验,据上表结果,最好选择家蚕品种是_______________

杂交实验及结果如下表:

亲本

实验一

♀抗药型

×♂敏感型

实验二

♀敏感型

×♂抗药型

实验三

实验一的

F1×抗药型

实验四

实验二的

F1×敏感型

实验五

实验一的

F1自交

实验六实验二的F1自交

子代

抗药型

0

0

67

0

37

34

敏感型

80

80

83

150

113

116

实验一和实验二的结果表明,家蚕抗药型是由位于____________染色体上的____性基因控制的;实验____的结果表明,F1产生两种配子且比例为11

3Bt毒蛋白与家蚕幼虫的中肠细胞特异性受体结合,使细胞膜穿孔,细胞裂解,幼虫死亡。为从分子水平上阐明家蚕产生抗药性的原因,研究人员从实验一亲本________________细胞中提取总RNA,获取cDNA,测定亲本受体基因碱基序列如图。

起始密码子

终止密码子

酪氨酸密码子

AUG/GUG

UAA/UAG

UAU/UAC

从分子水平推测家蚕抗药性产生的原是敏感型受体基因中插入3个碱基对,导致____(填写变异类型),进而在受体蛋白中插入一个氨基酸(酪氨酸),受体蛋白结构改变,使受体不能与Bt毒蛋白结合而产生抗药性。

4)依据Bt受体基因设计的靶向sgRNA,可以与限制酶Cas9结合,定点切除受体基因的39个核苷酸。sgRNACas9mRNA的混合物注射到____型家蚕受精卵中,若其发育成的家蚕幼虫表现为________,则进一步证明上述推测成立。

5)基因编辑技术能精确靶向修饰生物体基因组特定位点,人为改造生物体的遗传信息。请从利或弊某一方面说明该技术的应用是一把“双刃剑”: ____

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